הבדל מפתח - אימונוציטוכימיה לעומת אימונוהיסטוכימיה
Immunocytochemistry (ICC) ואימונוהיסטוכימיה (IHC) הן שתי טכניקות בשימוש נרחב באבחון מולקולרי, המזהה ומאשר את התרחשותן של מחלות לא מדבקות והן של מחלות מדבקות על סמך הסמנים המולקולריים הקיימים בתאים. ההבדל העיקרי באימונוציטוכימיה ואימונוהיסטוכימיה הוא המולקולה המשמשת כהליך הניתוח בטכניקות אלה. ב-ICC, נעשה שימוש בנוגדנים ראשוניים ומשניים המצומדים בסמנים כגון פלואורסצנציה ואילו IHC, נוגדנים חד שבטיים ופוליקלונליים משמשים לקביעות האבחון.
מהי אימונוציטוכימיה (ICC)?
ICC משתמש בנוגדנים ראשוניים ומשניים הקשורים לסמנים כגון סמנים פלואורסצנטיים או אנזימים והיא שיטת זיהוי רבת עוצמה לאיתור אנטיגנים הנמצאים על תאי מטרה שיכולים להיות חלקיקים תאיים מדבקים או תאי גידול סרטניים. נדרשים שלושה סוגים של בקרות עבור אימונוציטוכימיה.
- נוגדן ראשוני – בקרה המראה את הספציפיות של הנוגדן הראשוני הנקשר לאנטיגן
- נוגדן שניוני - פקד שמראה שהתווית היא ספציפית לנוגדן הראשי
- בקרות תווית - הראה שהתיוג הוא תוצאה של התווית שנוספה ולא תוצאה של תיוג אנדוגני.
איור 01: אימונוציטוכימיה מסמנת חלבונים בודדים בתוך תאים (כאן, טירוזין הידרוקסילאז באקסונים של נוירונים אוטונומיים סימפטיים מוצגים בירוק).
בקרת הנוגדנים העיקרית היא ספציפית לכל נוגדן חדש ולא ניתן לחזור עליה בכל ניסוי. בקרת הנוגדנים המשנית מתוכננת על סמך הנוגדן הראשוני שנוצל בניסוי ונכללת בכל ניסוי. בקרת התוויות נכללת אם תנאי של ההליך משתנה, הדוגמה משתנה, או כאשר נמצא תיוג בלתי צפוי.
שני היישומים העיקריים של ICC הם Radio Immuno – Assay (RIA) ו-Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). הנוגדן הנפוץ ביותר בשימוש הוא האימונוגלובולין G.
מהי אימונוהיסטוכימיה (IHC)?
באימונוהיסטוכימיה, דגימת המקור מכילה נוגדנים חד שבטיים ופוליקלונליים על מנת לקבוע נוכחות של אנטיגנים בתאים זרים.טכניקה זו מבוססת על התגובה הספציפית של קשירת אנטיגן-נוגדנים. ניתן לתייג את הנוגדנים המשמשים בזיהוי באמצעות סמנים שונים; הם יכולים להיות סמני פלואורסצנציה, סמנים מסומנים רדיואקטיביים או סמנים כימיים. באמצעות הקלת הקישור במבחנה בין האנטיגן לנוגדן הממוקד, ניתן לקבוע נוכחות או היעדר חלבון מסוים של תא.
איור 02: צביעה אימונוהיסטוכימית של כליה תקינה עם CD10
כיום, מדענים מעורבים בפיתוח נוגדני מטרה לאנטיגנים ספציפיים הקיימים בתאים שיכולים להתפתח כתאי גידול ממאירים או אנטיגנים הקיימים בגורמים מדבקים כמו HIV.
מהם הדמיון בין אימונוציטוכימיה לאימונוהיסטוכימיה?
- התגובות מאוד ספציפיות ומדויקות ב-ICC וב-IHC.
- היישומים של ICC ו-IHC כוללים אבחון סרטן ומחלות זיהומיות.
- יש לשמור על תנאים סטריליים בשני התנאים, ויש לבצע אותם במבחנה
- שתי הטכניקות מספקות תוצאות שניתן לשחזר.
- שניהם מהירים.
- תיוג רדיו, טכניקות פלואורסצנטי משמשות כשיטות זיהוי הן ב-ICC והן ב-IHC.
- שניהם מבוססים על זיווג אנטיגן-נוגדנים.
מה ההבדל בין אימונוציטוכימיה לאימונוהיסטוכימיה?
Immunocytochemistry (ICC) לעומת Immunohistochemistry (IHC) |
|
| ICC משתמש בסמנים הקשורים לנוגדנים ראשוניים ומשניים כגון סמנים פלואורסצנטיים או אנזימים והיא שיטת זיהוי רבת עוצמה לזיהוי אנטיגנים המצויים על תאי מטרה. | IHC היא שיטה המשתמשת בנוגדנים חד שבטיים ופוליקלונליים כדי לקבוע את נוכחותם של אנטיגנים שהם סמני חלבון מיוחדים הממוקמים על משטחי התא. |
| מקור לדוגמה | |
| דגימות המופקות מרקמות שעברו עיבוד היסטולוגי למקטעים דקים משמשות ב-ICC. | IHC משתמש בדגימות המורכבות מתאים שגדלו בשכבה חד-שכבתית או תאים בתרחיף המופקדים על שקף. |
| עיבוד לדוגמה | |
| ב-ICC, התאים צריכים להיות חדירים כדי להקל על חדירת נוגדנים למטרות התוך-תאיות. | ב-IHC, התאים מקובעים בפורמלין, מוטבעים בפרפין לפני הצביעה. |
סיכום – אימונוציטוכימיה לעומת אימונוהיסטוכימיה
אבחון מולקולרי משמש כדי לזהות ולאשר את התרחשותן של מחלות לא מדבקות והן של מחלות מדבקות על סמך הסמנים המולקולריים הקיימים בתאים. סמנים מולקולריים יכולים להיות חלבונים או רצפים של DNA או RNA; פיתוח טכנולוגיות כמו ICC ו-IHC סלל את הדרך למדענים לזהות את המחלה ואת הגורם לה בשלב מוקדם. גם ICC וגם IHC תלויים בתגובות הספציפיות בין נוגדן לאנטיגן אם כי מקור הדגימה. ההבדל העיקרי בין אימונוציטוכימיה לאימונוהיסטוכימיה הוא עיבוד המדגם של שני ההליכים.
הורד גרסת PDF של אימונוציטוכימיה לעומת אימונוהיסטוכימיה
ניתן להוריד את גרסת ה-PDF של מאמר זה ולהשתמש בה למטרות לא מקוונות לפי הערת ציטוט. אנא הורד כאן גרסת PDF ההבדל בין אימונוציטוכימיה ואימונוהיסטוכימיה.
