ההבדל העיקרי בין ELISA תחרותי ללא תחרותי הוא ש-ELISA תחרותי משתמש באנטיגן מעכב בעוד ש-ELISA לא תחרותי אינו משתמש באנטיגן מעכב עבור המבחן.
-Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) הוא בדיקה אימונולוגית המזהה מטרות שונות כגון נוגדנים, אנטיגנים, חלבונים וגליקופרוטאין. זוהי שיטה מהירה ופשוטה לביצוע. לפיכך, הוא משמש לעתים קרובות יותר למטרות מחקר ואבחון. ELISA כולל שימוש באנזימים וקשירה ספציפית של נוגדנים ואנטיגן. בהתבסס על האופן שבו התגובות מתרחשות, ישנם ארבעה סוגים של ELISA: ELISA ישיר, ELISA עקיף, סנדוויץ' ELISA ו-ELISA עיכוב. ELISA ישיר, עקיף וכריך הם סוגים של ELISA לא תחרותי בעוד ELISA עיכוב הוא סוג של ELISA השלמה. המטרה העיקרית של מאמר זה היא לדון בהבדל בין ELISA תחרותי ללא תחרותי.
מהי ELISA תחרותי?
Competitive ELISA מודד את ריכוז האנטיגן בדגימה באמצעות זיהוי של הפרעות אות. כאן, המבחן משתמש באנטיגן מעכב. לפיכך, זהו סוג של ELISA עיכוב. במהלך הליך זה, האנטיגנים הקיימים בדגימה מתחרים עם אנטיגן הייחוס שנבחר על קישור לכמות מסוימת של נוגדן מסומן. יתר על כן, הליך זה מתחיל עם הדגירה של הדגימה, עם הכמות העודפת של נוגדן מסומן. כמו כן, אנטיגן הייחוס צריך להיות מצופה מראש על צלחת בדיקה מרובה בארות. לאחר מכן יש להוסיף את תערובת הדגימה לצלחת הבדיקה המכילה את אנטיגן הייחוס. נוגדנים חופשיים ייקשרו לאנטיגן הייחוס בהתאם לכמות האנטיגן בדגימה.לפיכך, אם קיים יותר אנטיגן מדגם, פחות אנטיגן התייחסות יתגלה. לפיכך, הוא יוצר אות חלש יותר.
איור 01: ELISA
לעומת זאת, כאשר הדגימה מכילה פחות כמות של אנטיגן, יותר ויותר אנטיגן התייחסות יתפוס את הנוגדנים ויתן אות חזק. מאחר ש-ELISA תחרותי נותן אות חזק יותר כאשר הדגימה מכילה כמות נמוכה של אנטיגנים, ELISA תחרותי הוא בדיקה רגישה מאוד, אפילו עבור דגימות עם מספר קטן של אנטיגנים.
בכמה ערכות ELISA תחרותיות, נעשה שימוש באנטיגן מסומן במקום בנוגדן מסומן. כאן, האנטיגן המסומן והאנטיגן המדגם יתחרו על הקישור לנוגדן הראשוני. באופן דומה, כאשר כמות האנטיגן בדגימה נמוכה, כמות האנטיגן המסומן הנקשר לנוגדנים תהיה גבוהה יותר ותיצור אות חזק יותר.
מהי ELISA לא תחרותי?
בין ארבעת סוגי ה-ELISA, שלושה סוגים הם ELISA לא תחרותי. הם ELISA ישיר, ELISA עקיף ו-Sandwich ELISA. כל שלושת הפורמטים פועלים לפי העיקרון המשותף של ELISA עם הבדלים קלים במתודולוגיות שלהם.
Direct ELISA משתמש בנוגדן ראשוני המסומן באנזים. לפיכך, הוא אינו דורש נוגדן משני. לכן, ELISA ישיר מהיר יותר מאשר סוגים אחרים של ELISA. הנוגדן הראשוני ייקשר ישירות לאנטיגן המטרה המשובש שנמצא בצלחת. לפיכך, תגובת האנזים-סובסטרט תתרחש, ותיצור אות גלוי.
איור 02: Sandwich ELISA
בניגוד ל-ELISA ישיר, ELISA עקיף משתמש בנוגדן ראשוני לא מסומן ובנוגדן משני המסומן באנזים.ברגע שהנוגדן הראשוני נקשר לאנטיגן המשוקע, הנוגדן המשני נקשר לנוגדן הראשוני. האנזים בנוגדן המשני יגיב עם האנטיגן ויפיק אות גלוי. סנדוויץ' ELISA שונה מ-ELISA ישיר וגם עקיף. כאן, הנוגדן מקובע לדופן צלחת הבדיקה.
מהם הדמיון בין ELISA תחרותי ללא תחרותי?
- ELISA תחרותי ולא-תחרותי הם שני סוגים של טכניקות ניסוי אימונוסורבנט.
- הם טכניקות גמישות ורגישות ביותר.
- יתר על כן, ELISA תחרותי ולא תחרותי הן מבחני חיסון מקושרים לאנזים.
- כמו כן, שתי השיטות יוצרות אות עקב תגובה של אנזים-סובסטרט.
מה ההבדל בין ELISA תחרותי ללא תחרותי?
Competitive ELISA הוא סוג של ELISA המסתמך על השלמה בין אנטיגן אנליט לאנטיגן מסומן עבור כמות מוגבלת של נוגדן ספציפי.מצד שני, לא קיימת תחרות כזו בין אנטיגן מעניין לאנטיגן התייחסות ב-ELISA לא תחרותי. לפיכך, זהו ההבדל העיקרי בין ELISA תחרותי ללא תחרותי. באופן דומה, ELISA תחרותי היא ELISA מעכב ואילו ELISA לא תחרותי אינו ELISA מעכב. אז זה גם הבדל בין ELISA תחרותי ללא תחרותי.
יתר על כן, ELISA תחרותי מתאימה יותר למדידת כמות נמוכה של אנטיגן לעניין. זו שיטה רגישה. מצד שני, ELISA לא תחרותי אינו תלוי במספר האנטיגנים הקיימים בדגימה. לכן, זהו גם הבדל בין ELISA תחרותי ללא תחרותי.
למטה אינפוגרפיקה מסבירה את ההבדל בין ELISA תחרותי ללא תחרותי באופן השוואתי.
סיכום – תחרותי לעומת לא תחרותי ELISA
ELISA תחרותי ולא תחרותי הם שני הסוגים העיקריים של ELISA או מבחני אימונוסורבנט מקושרים לאנזים. בסיכום ההבדל בין ELISA תחרותי ללא תחרותי, ה-ELISA התחרותי מסתמך על התחרות בין אנטיגן של עניין ואנטיגן התייחסות כלפי הכמות המוגבלת של נוגדנים. לכן, ELISA תחרותי נקראת גם ELISA עיכוב. מצד שני, ELISA לא תחרותי אינו מסתמך על התחרות בין אנטיגנים מטרה ואנטיגנים התייחסות. הוא משתמש בעודף של נוגדן ספציפי מסומן לכיוון האנליט המעניין. לפיכך, זהו ההבדל העיקרי בין ELISA תחרותי ללא תחרותי. ELISA ישיר, ELISA עקיף ו-Sandwich ELISA הם שלושת הסוגים העיקריים של ELISA לא תחרותי.
