הבדל מפתח - TLC לעומת HPTLC
TLC ו-HPTLC הן שתי טכניקות כימיות המשמשות להפרדת רכיבים לא נדיפים בתערובת. ההבדל העיקרי בין TLC ל-HPTLC הוא שלחומר הסופג בצלחת TLC יש חלקיקים גדולים בעוד שבצלחות HPTLC יש חלקיקים קטנים מאוד של חומר סופג.
TLC היא כרומטוגרפיה שכבה דקה. HPTLC היא כרומטוגרפיית שכבה דקה בעלת ביצועים גבוהים, שהיא טכניקה מתקדמת בהשוואה לשיטת TLC.
מה זה TLC?
TLC או כרומטוגרפיה שכבה דקה היא טכניקה כימית בסיסית המשמשת להפרדת רכיבים לא נדיפים בתערובת.ניסוי זה מתבצע באמצעות יריעות זכוכית, פלסטיק או נייר. יריעה זו מצופה בשכבה דקה של תאית או סיליקה ג'ל (חומר סופח). שכבה דקה זו ידועה בתור השלב הנייח של TLC. הגיליון ידוע בשם לוחית TLC.
לפני הניסוי, קו בסיס וקו עליון מסומנים בעיפרון על לוחית ה-TLC. ואז הדגימה נצפתה לאורך קו זה באמצעות צינור נימי. לאחר מכן, לוחית TLC ממוקמת אנכית בשלב נייד. הפאזה הניידת היא ממס (או תערובת של ממיסים) המונח במיכל. כאשר מניחים את צלחת TLC בשלב נייד זה, יש לשמור על קו הבסיס מעל השוליים של הממס. אחרת, המדגם תומס בממס.
צלחת TLC מורשית להישאר בשלב הנייד למשך זמן מה. לאחר מכן, עם הזמן, הפאזה הניידת עולה כלפי מעלה על הצלחת עקב פעולה נימית. אם המדגם מסיס בשלב הנייד, הוא יעלה כלפי מעלה יחד עם השלב הנייד.
עקרון ה-"like dissolves like" עומד מאחורי שיטת TLC זו. המשמעות היא שתרכובות קוטביות מתמוססות בממסים קוטביים ואילו תרכובות לא קוטביות מתמוססות בממסים לא קוטביים. השלב הנייח הוא בדרך כלל סיליקה ג'ל או תאית, שהיא תרכובת קוטבית. הפאזה הניידת המשמשת היא ממס לא קוטבי כגון הקסאן. לכן, אם המדגם מכיל רכיבים לא קוטביים כלשהם, רכיבים אלה ינודדו כלפי מעלה יחד עם השלב הנייד. רכיבי קוטב יידבקו לצלחת. בין הרכיבים הנעים, תרכובות לא קוטביות בינוניות ינודו לאט ואילו תרכובות לא קוטביות מאוד ינודו במהירות. כאשר חזית הממס הגיעה לקו העליון של לוחית ה-TLC, מוציאים את הצלחת ומניחים לייבוש.
איור 01: טכניקת TLC
אם הרכיבים בדוגמה היו תרכובות צבעוניות, צריכים להיות כתמים צבעוניים על הצלחת במקומות שונים.אבל אם הרכיבים היו חסרי צבע, יש להשתמש בטכניקות אחרות; לדוגמה, ריסוס נינהידרין כדי לזהות אמוניה או אמינים (אמינים ראשוניים ואמינים משניים).
מה זה HPTLC?
HPTLC או כרומטוגרפיית שכבה דקה בביצועים גבוהים היא הצורה המתקדמת של כרומטוגרפיה דקה (TLC). הרזולוציה והדיוק של HPTLC גבוהים מאוד. רוב השלבים בטכניקה זו יכולים להיות אוטומטיים.
הצלחות המשמשות ב-HPTLC מכילות חלקיקי סיליקה ג'ל בגודל קטן מאוד וצפיפות האריזה של הג'ל על הצלחת גבוהה. פני הצלחת חלקים ונותנים הפרדה יעילה. הניתוח מהיר יותר מטכניקת TLC. גם הרגישות של שיטה זו גבוהה. ב-HPTLC, ניתן להפריד מספר דגימות שונות באותה צלחת ללא כל שלב הכנת דגימה.
מה ההבדל בין TLC ל-HPTLC?
TLC לעומת HPTLC |
|
| TLC היא כרומטוגרפיה של שכבה דקה. | HPTLC היא כרומטוגרפיית שכבה דקה בביצועים גבוהים. |
| טכניקה | |
| זוהי טכניקה כימית בסיסית המשמשת להפרדת רכיבים לא נדיפים בתערובת. | זו הצורה המתקדמת של כרומטוגרפיה שכבה דקה (TLC). |
| צלחת | |
| צלחת TLC יכולה להיות עשויה מנייר, פלסטיק או זכוכית אשר מיושם בחומר סופח בעל חלקיקים גדולים. | לצלחות HPTLC יש חלקיקים קטנים מאוד של חומר סופח. |
| החלטה | |
| שיטת TLC נותנת רזולוציה גרועה כאשר לדוגמא יש רכיבים בעלי מאפיינים דומים. | שיטת HPTLC נותנת רזולוציה גבוהה. |
| Time | |
| טכניקת TLC היא טכניקה שגוזלת זמן. | HPTLC נותן תוצאות במהירות גבוהה יותר משיטת TLC. |
סיכום – TLC לעומת HPTLC
HPTLC היא הצורה המתקדמת של TLC. ההבדל העיקרי בין TLC ל-HPTLC הוא שצלחת ה-TLC יכולה להיות עשויה מנייר, פלסטיק או זכוכית אשר מיושמת עם חומר סופח בעל חלקיקים גדולים בעוד שבצלחות HPTLC יש חלקיקים קטנים מאוד של חומר סופח.
