ההבדל העיקרי בין כרומטוגרפיה של חילופי יונים לכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל הוא שכרומטוגרפיה של חילופי יונים משמשת לניתוח חומרים יוניים לפי המטען בעוד שכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל משמשת לניתוח מולקולות גדולות לפי הגודל.
כרומטוגרפיה היא טכניקה אנליטית שניתן להשתמש בה כדי לנתח תערובות שונות. הטכניקות הכרומטוגרפיות נקראות לפי הפרמטר המשמש לניתוח החומרים - למשל. כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל, כרומטוגרפיה של חילופי יונים וכו'.
מהי כרומטוגרפיית החלפת יונים?
כרומטוגרפיה של חילופי יונים היא טכניקה אנליטית שבה נוכל לנתח חומרים יוניים.לעתים קרובות זה שימושי לנתח אניונים וקטיונים אנאורגניים (כלומר אניונים כלוריד וחנקתי ואשלגן, קטיונים נתרן). למרות שזו לא שיטה נפוצה במיוחד, אנו יכולים לנתח באמצעותה יונים אורגניים. יתר על כן, אנו יכולים להשתמש בטכניקה זו לטיהור חלבונים מכיוון שחלבונים הם מולקולות טעונות בערכי pH מסוימים. כאן, אנו משתמשים בשלב נייח מוצק שאליו יכולים החלקיקים הטעונים להיצמד. לדוגמה, נוכל להשתמש בקופולימרים פוליסטירן-דיווינילבנזן שרף כתמיכה מוצקה.
איור 01: התיאוריה מאחורי כרומטוגרפיית החלפת יונים
כדי להסביר זאת יותר, לשלב הנייח יש יונים קבועים כגון אניוני סולפט או קטיונים אמיניים רבעוניים. כל אחד מאלה צריך להתחבר ליון נגדי (יון בעל מטען הפוך) אם ברצוננו לשמור על הנייטרליות של מערכת זו.אם יון הנגד הוא קטיון, אז אנו קוראים למערכת כשרף חילופי קטונים. אבל, אם הנגדיון הוא אניון, המערכת היא שרף חילופי אניונים. יתר על כן, ישנם חמישה שלבים עיקריים בכרומטוגרפיה של חילופי יונים:
- שלב ראשוני
- ספיחה של היעד
- התחלת הפליטה
- סיום ההחלפה
- Regeneration
מהי כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל?
Size Exclude Chromatography או SEC היא טכניקה אנליטית שבה ניתן להפריד מולקולות בתערובת לפי גודלן ומשקל המולקולה שלהן. בדרך כלל, זה עובד עם מולקולות גדולות הנקראות מקרומולקולות. בדרך כלל משתמשים בתמיסה מימית לניתוח. אז זה נקרא כרומטוגרפיה של סינון ג'ל. כאשר הוא ממס אורגני, זה נקרא כרומטוגרפיה של ג'ל חדירה.
כרומטוגרפיה של סינון ג'ל היא צורה של כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל שבה אנו משתמשים בתמיסה מימית כשלב הנייד.לכן, השלב הנייד בו אנו משתמשים לעתים קרובות בטכניקה זו הוא חיץ מימי. כמו כן, אנו משתמשים בעמודה כרומטוגרפית להפרדה זו, ועלינו לארוז את העמודה בחרוזים נקבוביים. בדרך כלל, Sephadex ו- agarose שימושיים כחומר נקבובי. לפיכך, החומרים הללו הם השלב הנייח של הניסוי שלנו. יתר על כן, אנו יכולים להשתמש בגודל הנקבוביות של חרוזים אלה כדי לקבוע את גודל המקרומולקולות שאנו מפרידים. עם זאת, זו רק הערכה.
איור 02: מכשיר לכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל
כרומטוגרפיה חדירת ג'ל היא צורה של כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל שבה אנו משתמשים בממס אורגני כשלב הנייד. לכן, אנו יכולים להשתמש בתמיסות כמו הקסאן וטולואן למטרה זו.השלב הנייח הוא חומר נקבובי, כמו בכרומטוגרפיה של סינון ג'ל. טכניקה זו מיושמת לעתים קרובות על פולימרים וחומרים מסיסים אורגניים אחרים. שיטת הפעולה של הטכניקה דומה לזו של כרומטוגרפיה של סינון ג'ל.
מה ההבדל בין כרומטוגרפיה של החלפת יונים לכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל?
כרומטוגרפיה היא טכניקה אנליטית שניתן להשתמש בה כדי לנתח תערובות שונות. ההבדל העיקרי בין כרומטוגרפיה של חילופי יונים לכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל הוא שכרומטוגרפיה של חילופי יונים משמשת לניתוח חומרים יוניים לפי המטען ואילו כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל משמשת לניתוח מולקולות גדולות לפי הגודל.
למטה אינפוגרפיקה מספקת מידע נוסף על ההבדל בין כרומטוגרפיה של החלפת יונים וכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל.
סיכום – כרומטוגרפיה של חילופי יונים לעומת אי הכללת גודל
כרומטוגרפיה היא טכניקה אנליטית שניתן להשתמש בה כדי לנתח תערובות שונות. ההבדל העיקרי בין כרומטוגרפיה של חילופי יונים לכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל הוא שכרומטוגרפיה של חילופי יונים משמשת לניתוח חומרים יוניים לפי המטען ואילו כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל משמשת לניתוח מולקולות גדולות לפי הגודל.
