ההבדל העיקרי בין HPLC ל-UPLC הוא שה-HPLC מאפשר ניתוח של חלקיקים שגודלם סביב 5 מיקרומטר ואילו UPLC מאפשר חלקיקים קטנים בהרבה בסביבות 2 מיקרומטר.
HPLC ו-UPLC הן שתיהן טכניקות כרומטוגרפיות נוזליות המועילות בהפרדת מרכיבי התרכובת. כדי לדעת את ההבדל בין HPLC ל- UPLC, עלינו קודם כל לדעת מה זה HPLC. הסיבה לכך היא ש-UPLC היא גרסה מיוחדת של HPLC ואנחנו יכולים להבין אותה בקלות אם אנחנו יודעים מה זה HPLC.
מה זה HPLC?
המונח HPLC מייצג High Performance Liquid Chromatography.זוהי טכניקה שאנו יכולים להשתמש בה כדי להפריד בין מרכיבים שונים של תרכובת. כמו כן, זוהי הטכניקה הנפוצה ביותר לזיהוי, כימות והפרדה של מרכיבים של תערובת. חוץ מזה, טכניקה זו משתמשת בלחץ גבוה כדי לדחוף ממסים דרך העמוד. יתר על כן, היישומים העיקריים של HPLC הם בביוכימיה לניתוח מרכיבים של תרכובת. זוהי דרך אידיאלית להפרדה וזיהוי של חומצות אמינו, חומצות גרעין, חלבונים, פחמימנים, חומרי הדברה, פחמימות, אנטיביוטיקה, סטרואידים ואינספור חומרים אנאורגניים אחרים.
איור 01: מערכת HPLC במעבדה
בקיצור, שיטת הפעולה של טכניקת HPLC היא כדלקמן. ראשית, עלינו להכניס את המדגם לזרם השלב הנייד בכמויות קטנות בדידות באמצעות משאבה.לחץ המשאבה צריך להישמר על 40 MPa. לאחר מכן, זרם הפאזה הנייד הזה מחלחל דרך העמודה של HPLC. כמו כן, הרכיבים במדגם עוברים בעמודה. עם זאת, מהירויות התנועה שלהם שונות זו מזו. הבדל זה נובע מההבדל באינטראקציות בין מרכיבי הדגימה לבין הסופח בתוך העמוד. אנו קוראים לספח הזה כפאזה נייח מכיוון שהוא שוכן בתוך העמוד (לא זז). שנית, בסוף הטור, נוכל לאסוף את הדגימה היוצאת מהעמודה. שם נוכל לקבוע את ההבדלים בזמני השמירה עבור כל רכיב במדגם.
מה זה UPLC?
המונח UPLC מייצג Ultra High-Performance Liquid Chromatography. זוהי וריאציה של HPLC, אך שיטת הפעולה זהה. עם זאת, בניגוד ל-HPLC, שיטה זו מאפשרת לנתח חלקיקים קטנים מאוד, כגון חלקיקים קטנים בגודל 2 מיקרומטר.
איור 02: התקן UPLC
יתר על כן, הוא מספק ניתוח מהיר יותר. בטכניקה זו, אנו משתמשים בלחץ משאבת 100 MPa להכנסת המדגם לעמודה. לפיכך, לחץ גבוה זה מאשר שכל המדגם מוכנס לעמודה. לפיכך, זה יעיל מאוד בהשוואה ל-HPLC.
מה ההבדל בין HPLC ל-UPLC?
המונח HPLC מייצג High Performance Liquid Chromatography ואילו המונח UPLC מייצג Ultra High Performance Liquid Chromatography. לכן, טכניקת UPLC היא גרסה מפותחת של HPLC. לפיכך, שיטת הפעולה זהה עבור שתי הטכניקות. עם זאת, UPLC יעיל יותר בהשוואה ל-HPLC מכיוון שהוא משתמש בלחץ משאבה גבוה; לחץ המשאבה עבור HPLC הוא 40 MPA בעוד שהוא 100 MPa עבור UPLC. לכן, זהו הבדל בין HPLC ל- UPLC.מעל לכל, ההבדל העיקרי בין HPLC ל-UPLC הוא שה-HPLC מאפשר ניתוח של חלקיקים שגודלם בסביבות 5 מיקרומטר ואילו UPLC מאפשר חלקיקים קטנים בהרבה בסביבות 2 מיקרומטר.
סיכום – HPLC לעומת UPLC
UPLC הוא סוג של HPLC. לפיכך, שיטות הפעולה זהות. אבל, אנחנו יכולים למצוא כמה תכונות משופרות ב-UPLC בהשוואה ל-HPLC. לכן, יש הבדל מסוים בין HPLC ל- UPLC. עם זאת, ההבדל העיקרי בין HPLC ל-UPLC הוא שה-HPLC מאפשר ניתוח של חלקיקים שגודלם בסביבות 5 מיקרומטר ואילו ה-UPLC מאפשר חלקיקים קטנים בהרבה בסביבות 2 מיקרומטר.
