ההבדל העיקרי בין HPLC ל-HPLC מהיר הוא שלחץ המשאבה שבו אנו משתמשים עבור HPLC הוא סביב 40 MPa בעוד שלחץ המשאבה עבור HPLC מהיר הוא סביב 3-5 MPa.
הטכניקה הנפוצה ביותר בה אנו משתמשים להפרדת רכיבים של תערובת היא "כרומטוגרפיה נוזלית". ישנן מספר טכניקות להשגת מטרה זו, מהן HPLC פופולרי מאוד. HPLC ראשי תיבות של High Performance Liquid Chromatography המזהה, מכמת ומפריד רכיבים של תערובת נוזלית בצורה מהירה ויעילה. מהיר HPLC הוא יישום מיוחד של HPLC אשר משך לאחרונה את תשומת לבם של המעורבים בחקר הפתרונות.
מה זה HPLC?
HPLC היא כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים. הוא עושה שימוש בלחץ גבוה כדי לדחוף ממסים כך שיעברו דרך עמודה. כמו כן, זוהי דרך אידיאלית להפריד ולחקור תרכובות שונות כגון חומצות אמינו, חומצות גרעין, פחמימות, סטרואידים, אנטיביוטיקה ופחמימנים. ל-HPLC יתרונות רבים על פני שיטות אחרות של הפרדת תערובות כמו רזולוציה גבוהה יותר וניתוח מהיר יותר. הוא מבטל את הצורך באריזה מחדש ובחידוש ומציע שליטה טובה יותר על פרמטרים ובכך מגדיל את יעילות ההפרדה. באופן אידיאלי, HPLC מתאים ליישומים בקנה מידה גדול מכיוון שהוא יכול להפריד חלקיקים קטנים מאוד ומאפשר שימוש בלחצים גבוהים שמקלים על זרימת ממיסים בקלות.
איור 01: עמודת HPLC
בקיצור, שיטת הפעולה של טכניקת HPLC היא כדלקמן. ראשית, עלינו להכניס את המדגם לזרם השלב הנייד בכמויות קטנות בדידות באמצעות משאבה. לחץ המשאבה צריך להישמר על 40 MPa. זרם זה של שלב נייד מחלחל דרך העמודה של HPLC. לאחר מכן, הרכיבים במדגם עוברים גם הם דרך העמודה. עם זאת, מהירויות התנועה שלהם שונות זו מזו בגלל ההבדל באינטראקציות בין מרכיבי הדגימה לבין הסופח בתוך העמוד. אנו קוראים לספח הזה כפאזה נייח מכיוון שהוא שוכן בתוך העמוד (לא זז). לאחר מכן, בסוף הטור, נוכל לאסוף את הדגימה היוצאת מהעמודה, ובכך נוכל לאסוף את הרכיבים בדגימה בנפרד.
מה זה HPLC מהיר?
לאחרונה, מדעני מחקר במכון המחקר Schering Plough פיתחו טכניקת HPLC מהירה שהיא גרסה מתקדמת של HPLC שכן היא מאפשרת הפרדה מהירה עוד יותר של תרכובות מתערובת.כמו כן, הידועה כ-HPLC מהיר, טכניקה זו עושה שימוש בחלקיקי סיליקה הליבה התמזגו 2.7um המיוצרים על ידי איחוי סיליקה נקבובי של 0.5um על פני חלקיק סיליקה מוצק. החלקיקים הייחודיים הללו הופכים את הליך ההפרדה למהיר מאוד וגם זה בלחץ אחורי נמוך ממה שאנו משתמשים ב-HPLC.
איור 02: FPLC Apparatus
HPLC מהיר משיג תוצאות דומות ל-UPLC, אך מדענים סבורים שהטכניקה הזו עדיפה מכיוון שהיא אינה דורשת ציוד לחץ אולטרה-גבוה יקר במיוחד. מה שיפה הוא ש-HPLC מהיר אינו דורש שום פרוטוקולי מעבדה חדשים.
מה ההבדל בין HPLC ל-HPLC מהיר?
HPLC היא כרומטוגרפיה נוזלית בביצועים גבוהים ו-HPLC מהיר היא צורה מתקדמת של כרומטוגרפיה נוזלית בביצועים גבוהים.ההבדל העיקרי בין HPLC ל-HPLC מהיר הוא שלחץ המשאבה שבו אנו משתמשים עבור HPLC הוא בסביבות 40 MPa. בעוד שלחץ המשאבה עבור HPLC מהיר הוא סביב 3-5 MPa. יתר על כן, אנו יכולים להפריד בין תרכובות שונות כגון חומצות אמינו, חומצות גרעין, פחמימות, סטרואידים, אנטיביוטיקה ופחמימנים באמצעות טכניקת HPLC בעוד שטכניקת HPLC המהירה משמשת בעיקר להפרדה של חלבונים.
האינפוגרפיקה שלהלן מציגה מידע נוסף על ההבדל בין HPLC ל-HPLC מהיר.
סיכום – HPLC לעומת HPLC מהיר
HPLC היא טכניקה של כרומטוגרפיה נוזלית שהפכה פופולרית מאוד בכל העולם. מהיר HPLC היא גרסה חדשה של HPLC, מדעני מחקר במכון Schering Plough פיתחו את הטכניקה החדשה הזו.ההבדל העיקרי בין HPLC ל-HPLC מהיר טמון בלחץ המשאבה שבו אנו משתמשים להפרדה. זה; לחץ המשאבה שבו אנו משתמשים עבור HPLC הוא בסביבות 40 MPa. אבל, לחץ המשאבה עבור HPLC מהיר הוא בסביבות 3-5 MPa.
