טרנספורמציה לעומת טרנספקציה
טרנספורמציה וטרנספקציה הן שתי טכניקות פשוטות המשמשות להחדרת גן זר לתא מארח. עם זאת, טכניקות אלו תלויות בסוג המארחים או המערכות הווקטוריות.
מהו שינוי תאים?
טרנספורמציה היא הטכניקה המשמשת להחדרת גנים לתאי שמרים וחיידקים. טכניקה זו גורמת לרוב לשינויים תורשתיים בגנים, ולפיכך הביטוי של הגן הוא קבוע. הטרנספורמציה החיידקית הוצגה לראשונה בשנת 1928 על ידי פרדריק גריפית'. אז בתחילת שנות ה-70, טכניקה זו שימשה ב-E.קולי. במהלך תהליך הטרנספורמציה של E. coli, התאים מושרים בתמיסה קרה כקרח של CaCl2 שלב זה הופך את תאי ה-E.coli למוכשרים. לאחר מכן, התאים המוסמכים מעורבבים עם ה-DNA הפלסמיד ומודגרים על קרח למשך 20-30 דקות. לאחר מכן ניתן הלם חום קצר על מנת לאפשר את העברת ה-DNA לתוך התא. לבסוף, התאים ממוקמים במרק מזין ומודגרים ב-37 מעלות צלזיוס למשך 60-90 דקות על מנת לבסס את הפלסמידים. לאחר השלמת השלבים הללו בהצלחה, ניתן להניח את התאים שעברו טרנספורמציה על מדיה מתאימה להפצה של תאים. מכיוון שהטרנספורמציה נחשבת כטכניקה לא יעילה, אין להשתמש בה להכנת בנקים שיבוטים.
מהי העברת תאים?
טרנספקציה היא שיטה להחדרת גן זר, בדרך כלל, לתאי יונקים. ישנן שתי שיטות טרנספקציה; כלומר, טרנספקציה חולפת והעברה יציבה. בטרנספקציה חולפת, ביטוי גנים זמין לזמן מוגבל; לפיכך, השינוי בגן גורם לביטוי זמני.שיטת טרנספקציה זו פשוטה ומהירה; לפיכך ניתן להשתמש בו באופן שגרתי. חסרון אחד של טרנספקציה חולפת הוא הקושי להגיש בקשה למערכות סינתזת חלבון בקנה מידה גדול.
במהלך טרנספקציה יציבה, גן מטרה משולב בגנום של התא המארח, וכך ביטוי הגן הוא קבוע, בניגוד לטרנספקציה החולפת.
מה ההבדל בין טרנספורמציה לטרנספקציה?
• טרנספורמציה היא הכנסת גן לתא פרוקריוטי (חיידקי ושמרים), בעוד שטרנספקציה נקראת בדרך כלל הכנסת גן לתא יונק.
• טרנספורמציה גורמת לשינוי תורשתי בגנים, בעוד שהטרנספקציה יכולה לגרום לביטוי זמני או לשינויים קבועים בגנים.
