ההבדל העיקרי בין בדיקת חלבון ברדפורד ל-Lowry הוא שמבחן חלבון ברדפורד מבוסס על שינוי הספיגה של הצבע Coomassie brilliant blue G-250 בעוד שמבחן חלבון Lowry מבוסס על התגובה של יוני נחושת (Cu+) מיוצר על ידי חמצון של קשרי פפטיד עם ריאגנט Folin-Cioc alteu.
מבחן הוא טכניקה אנליטית המסייעת לאפיין את המרכיבים התפקודיים העיקריים של דגימה. לפיכך, בדיקה יכולה להיות בדיקה איכותית או כמותית. תחומים רבים כולל רפואת מעבדה, פרמקולוגיה, ביולוגיה סביבתית, ביולוגיה מולקולרית, ביוכימיה ואימונולוגיה משתמשים במבחנים מסוג זה באופן שגרתי.מבחן חלבון ברדפורד ולורי הם שני מבחני ביוכימיים הקובעים את ריכוז החלבון בתמיסת דגימה. שני המבחנים משתמשים בטכניקות קולורימטריות כדי לספק תוצאות.
מהו מבחן חלבון ברדפורד?
בדיקת חלבון ברדפורד היא הליך אנליטי ספקטרוסקופי מהיר לניתוח חלבון. זה מראה דיוק גבוה בעת מדידת ריכוז החלבון בתמיסה. מריון ברדפורד הציגה הליך זה בשנת 1976. בבדיקה זו, התגובה הכוללת מבוססת על הרכב חומצות האמינו של החלבונים הנמדדים. במונחים אחרים, בדיקת חלבון ברדפורד היא בדיקה קולורימטרית. הוא משתמש בצבע הכחול מבריק Coomassie. לפיכך, בדיקת חלבון קולורימטרית זו תלויה בשינוי הספיגה של הצבע. Coomassie brilliant blue G-250 קיים בשלושה פורמטים: קטיוני (אדום), אניוני (כחול) ונייטרלי (ירוק). בתנאים חומציים, הצורה האדומה של הצבע הופכת לכחול. זה מאשר את הקישור של החלבון. אם החלבון אינו קיים, התמיסה עשויה להישאר בצבע חום.
איור 01: בדיקת חלבון ברדפורד
מבחן חלבון ברדפורד שונה מבחני חלבון אחרים מכיוון שהוא פחות רגיש להפרעות של תרכובות כימיות שונות הקיימות בתמיסת החלבון. תרכובות אלו כוללות נתרן, אשלגן, גלוקוז וסוכרוז וכו'.
מהו מבחן חלבון Lowry?
בדיקת חלבון Lowry היא בדיקה ביוכימית המשמשת לקביעת רמת החלבון הכוללת בתמיסה. Oliver H. Lowry הוא האדם שפיתח ריאגנט זה בשנת 1940. ההליך מתאר את ריכוז החלבון הכולל של התמיסה על ידי שינוי צבע שהוא פרופורציונלי לריכוז החלבון בתמיסה. לפיכך, זהו גם בדיקת חלבון קולורימטרית.
התגובה בין יוני נחושת (Cu+) שנוצרת על ידי חמצון של קשרי פפטיד וריאגנט Folin-Cioc alteu היא הבסיס להליך זה.כמו כן, מגיב זה מכיל חומצה פוספומוליבדית וחומצה זרחתית-טונגסטית. עם זאת, מנגנון התגובה של בדיקת חלבון Lowry אינו מובן היטב. אבל זה כרוך בחמצון של שאריות ציסטאין, טריפטופן וטירוזין על ידי הפחתת ריאגנט Folin-Cioc alteu.
איור 02: בדיקת חלבון Lowry
שאריות הציסטאין תורמות לספיגה הנצפית בבדיקת חלבון Lowry והתגובה גורמת למולקולה כחולה מבריקה; הטרופולי מוליבדן כחול. ההפחתה של מולקולה זו נמדדת על ידי ספיגה ב-660 ננומטר. לפיכך, הריכוז של שאריות ציסטאין וטריפטופן שהפחיתו את ריאגנט Folin-Cioc alteu מסיק את הריכוז הכולל של החלבון בתמיסה.
מהם הדמיון בין בדיקת חלבון ברדפורד ל-Lory?
- מבחני חלבון ברדפורד ולורי קובעים את ריכוז החלבון בתמיסה.
- שתי השיטות הן שיטות קולורימטריות.
- כמו כן, הרגישות של שתי השיטות גבוהה.
מה ההבדל בין בדיקת חלבון ברדפורד ל-Lory?
מבחן חלבון ברדפורד ולורי הם שני סוגים של מבחני הקובעים את ריכוז החלבון בתמיסה. בדיקת חלבון ברדפורד מסתמכת על שינוי הספיגה של הצבע Coomassie brilliant blue G-250 בעוד שבדיקת חלבון Lowry תלויה בתגובה של יוני נחושת המיוצרים על ידי חמצון של קשרי פפטיד, עם ריאגנט Folin-Cioc alteu. אז זה ההבדל העיקרי בין בדיקת חלבון ברדפורד ללורי. בדיקת החלבון של ברדפורד לוקחת 15 דקות כדי להפיק תוצאה ואילו לבדיקת חלבון Lowery לוקח 40-60 דקות להפיק תוצאה. לפיכך, זהו הבדל נוסף בין בדיקת החלבון של ברדפורד ו- Lowry. יתר על כן, בדיקת חלבון ברדפורד תלויה בהרכב חומצות האמינו ואילו בדיקת חלבון Lowry תלויה חלקית בהרכב חומצות האמינו.לפיכך, זהו גם הבדל בין בדיקת חלבון ברדפורד ללורי.
Below inforaphic מספק פרטים נוספים על ההבדל בין בדיקת חלבון ברדפורד ל-Lory.
סיכום – מבחן חלבון ברדפורד נגד לאורי
מבחן הוא טכניקה אנליטית המשמשת לאפיון המרכיב התפקודי העיקרי של דגימה. מבחן חלבון ברדפורד ולורי הם שני סוגים של מבחני חלבון שמתפקדים בטכניקות קולורימטריות. מבחני חלבון ברדפורד וגם לורי קובעים את ריכוז החלבון בתמיסה. עם זאת, ההבדל העיקרי בין Bradford ו- Lowry Protein Assay טמון בטכניקה הקולורימטרית שבה הם משתמשים. בדיקת חלבון ברדפורד משתמשת ב-Coomassie brilliant blue G-250 בעוד שמבחן חלבון Lowry משתמש ביוני נחושת (Cu+) ובריאגנט Folin-Cioc alteu.יתר על כן, שיטת ברדפורד נותנת תוצאות מהירות מאשר בדיקת חלבון Lowry. עם זאת, שתי השיטות הן שיטות רגישות ביותר והן נתונות להפרעות מחומרים שונים.
