ההבדל העיקרי בין BL21 ל-DH5 Alpha הוא ש-BL21 הוא תא E. coli מוכשר מהונדס גנטית המשמש בעיקר לביטוי חלבון, בעוד ש-DH5 Alpha הוא תא E. coli מוכשר מהונדס גנטית עם מוטציה recA1 המשמשת בעיקר עבור טרנספורמציה של פלסמיד.
E. coli הוא אחד מהאורגניזמים המפורסמים המועדפים לייצור חלבון רקומביננטי. זה הפך לפלטפורמת הביטוי הפופולרית ביותר במהלך השנים. הוא משמש גם כמפעל תאים. BL21 ו-DH5 Alpha הם שני תאי E. coli מהונדסים גנטית המשמשים כיום לביטוי חלבון ולטרנספורמציה של פלסמיד, בהתאמה.
מה זה BL21?
BL21 הוא תא E.coli מוכשר שהונדס גנטית חסר פרוטאז המשמש בעיקר לביטוי חלבון. E. coli BL21 הוא תא חיידקי שמקורו בזן B. יש לו פגמים של Lon protease ו-ompT פרוטאז קרום חיצוני. הוא משמש בדרך כלל לביטוי חלבון רקומביננטי מכיוון שהוא בדרך כלל מביא יציבות לחלבונים המובעים. BL21 שימושי לביטוי חלבון עם pCold I-IV DNA ו-pCold TF DNA. אבל תא E. coli המוכשר הזה אינו מיועד למערכת ביטוי חלבון המשתמשת בפרוטור T7 כגון מערכת pET. הסיבה מאחורי זה היא BL21 אינו מבטא T7 RNA פולימראז. בנוסף, לא מומלץ להשתמש בו לבנייה או הכנה של פלסמיד מכיוון שאין לו מוטציה recA.
איור 01: BL21
BL21 תואר לראשונה על ידי Studier ב-1986 לאחר שינויים שונים בקו B. תאי BL21 חסרים בפרוטאז LON, אשר מפרק חלבונים זרים רבים. יתר על כן, חסר לו גן נוסף המקודד לפרוטאז הממברנה החיצונית (OmpT) שתפקידו לפרק חלבונים תאיים. מחסור בחלבונים אלו גורם לייצור מוצלח של חלבון זר בתאי E. coli BL21. יתר על כן, מוטציית hsdSB בתאים אלו מונעת מתילציה של DNA זר ושיבוש בתאי BL21.
מה זה DH5 Alpha?
DH5 אלפא הוא תא E. coli מוכשר מהונדס גנטית עם מוטציית recA1 המשמשת בעיקר לטרנספורמציה של פלסמיד. תאי DH5 Alpha E. coli מהונדסים גנטית על ידי הביולוג האמריקאי דאגלס האנהאן כדי למקסם את יעילות הטרנספורמציה. לתא DH5 אלפא יש שלוש מוטציות שונות: recA1, endA1 ו-lacZΔM15. recA1 היא מוטציה נקודתית אחת המחליפה את גליצין 160 בפוליפפטיד recA ושארית חומצה אספרטית.מוטציה זו משביתה את פעילות הרקומבינאזות ומשביתה את הרקומבינציה ההומולוגית. מוטציית endA1 משביתה אנדונוקלאז תוך תאי שמונע ממנו לפרק את הפלסמיד המוחדר.
איור 02: DH5 Alpha
יתר על כן, מוטציית lacZΔM15 מאפשרת הקרנה כחול-לבן של תאים שעברו טרנספורמציה. תאים אלה הם תאים מוכשרים. הם משמשים לעתים קרובות עם טרנספורמציה של סידן כלורי כדי להכניס את הפלסמיד הרצוי. זה זוהה על ידי מחקר עדכני שתא DH5 Alpha בשיטת Hanahan היה התא המוכשר ביותר לטרנספורמציה של פלסמיד.
מהם הדמיון בין BL21 ל-DH5 Alpha?
- BL21 ו-DH5 Alpha הם שניים מהונדסים גנטית E.coli
- שניהם תאים מוכשרים.
- הם מורכבים ממוטציות ברורות.
- לשניהם אין בית גידול טבעי.
- אלה משמשים למטרות מעבדה כגון מחקרי הבעה והליכי שיבוט.
מה ההבדל בין BL21 ל-DH5 Alpha?
BL21 הוא תא E. coli מוכשר שהונדס גנטית חסר פרוטאז המשמש בעיקר לביטוי חלבון. מצד שני, DH5 Alpha הוא תא E. coli מוכשר מהונדס גנטית עם מוטציית recA1 המשמשת בעיקר לטרנספורמציה של פלסמיד. אז זה ההבדל העיקרי בין BL21 ל-DH5 Alpha. יתר על כן, לתא BL21 E. coli אין מוטציה recA1, בעוד לתא DH5 Alpha E. coli יש מוטציה recA1.
האינפוגרפיקה הבאה מפרטת את ההבדלים בין BL21 ל-DH5 Alpha בצורה טבלה.
סיכום – BL21 לעומת DH5 Alpha
הזנים הלא-פתוגניים של E. coli פותחו גנטית על ידי מדענים למחקרי ביטוי מעבדתיים ולמטרות שיבוט. BL21 ו-DH5 Alpha הם שני תאי E. coli מהונדסים גנטית. BL21 משמש בעיקר למחקרי ביטוי חלבונים. מצד שני, DH5 Alpha משמש בעיקר למטרות טרנספורמציה של פלסמיד. לפיכך, זהו סיכום ההבדל בין BL21 ל-DH5 Alpha.
