הבדל מפתח – RPMI לעומת DMEM
רוב מחקרי המחקר כוללים תרבית תאי בעלי חיים ולכן, מחקרים אלה דורשים תחזוקה של קווי תאים בעלי חיים בתנאי גידול מיוחדים. גידול תאי בעלי חיים מבוצע באופן נרחב במחקרים תרופתיים לזיהוי מטבוליזם של תרופות, באבחון מחלות ובמחקר סרטן. מדיית תרבית התאים היא היבט חשוב של תרבית תאי בעלי חיים. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ו-Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) הם שני אמצעי תרבית המשמשים בגידול תאי בעלי חיים. RPMI הוא מדיה בשימוש נרחב להתרבות תאי יונקים בתרבית תרחיף. DMEM הוא סוג שונה של מדיום בסיסי, עם ריכוז גבוה של חומצות אמינו וויטמין עד פי 4. DMEM משמש בגידול תאים בתרבויות נצמדות. ההבדל העיקרי בין שתי התקשורת הוא סוג התרבות של התקשורת. RPMI משמש בתרביות תרחיף, בעוד ש-DMEM משמש להתרבות תאים נצמדים.
מה זה RPMI?
RPMI או Roswell Park Memorial Institute Medium מכונה גם RPMI 1640. שם המדיה נגזר על ידי המכון שבו התגלתה המדיה. מדיה זו משמשת בדרך כלל בתרבית תאי בעלי חיים, במיוחד לגידול תאי יונקים. הם פותחו במקור לגידול לימפוציטים אנושיים.
המרכיבים הבאים כלולים ב-RPMI.
- Glucose
- מחוון pH (פנול אדום)\
- מלחים (נתרן כלורי, נתרן ביקרבונט, דיסודיום פוספט, אשלגן כלורי, מגנזיום גופרתי וסידן חנקתי)
- חומצות אמינו
- ויטמינים (אי-אינוזיטול, כולין כלוריד, חומצה פארא-אמינו-בנזואית, חומצה פולית, ניקוטינאמיד, פירידוקסין הידרוכלוריד, תיאמין הידרוכלוריד, סידן פנטותנט, ביוטין וריבופלבין, ציאנוקובלמין)
התכונה המיוחדת של RPMI היא הריכוז המוגבר של פוספט במדיום. RPMI משמש באווירה של 5% פחמן דו חמצני. זה יספק את התנאים המקסימליים והאופטימליים לצמיחת התא. ה-pH של המדיה נשמר על 8.0 על ידי מערכת חציצה ביקרבונט.
איור 01: תרבית תאים על צלחת פטרי
יישומים של RPMI בתרבות תאים
- טיפוח לימפוציטים מסוג T ו-B אנושיים, תאי מח עצם והיברידומה.
- משמש לחקר תאים ניאופלאסטיים אנושיים.
מה זה DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) הוא מדיום שונה שמוכן מסחרית. המרקם המקורי של האבקה הבינונית הוא צהוב. ב-DMEM, ריכוז הוויטמין גדל עד פי ארבעה ובכך מגדיל את תכולת החומרים התזונתיים במדיום.
DMEM שונה גם על ידי הוספת מלחים נוספים כגון חנקתי ברזל, נתרן פירובט וכמה חומצות אמינו לא חיוניות כגון סרין וגליצין. גם הניסוח של גלוקוז במדיה משתנה. הפורמולה המקורית מורכבת מ-1000 מ"ג/ליטר של גלוקוז, בעוד שב-DMEM הריכוז גדל עד ל-4500 מ"ג/ליטר. DMEM גם דורש תוספת של מדיום סרום מכיוון שהוא אינו מדיום שלם. לרוב, DMEM מתווסף עם סרום בקר עוברי (FBS). FBS מספקת את החלבונים ואת גורמי הגדילה הנדרשים לתהליך התרבות.
ה-pH של המדיום משתנה עם הוספת סודיום ביקרבונט. ה-pH של המדיום לפני הוספת סודיום ביקרבונט הוא סביב 6.80 - 7.40, בעוד שה-pH לאחר הוספת סודיום ביקרבונט נע בטווח של 7.60 - 8.20. טמפרטורת האחסון של המדיום היא 2 – 8 0C.
איור 02: DMEM
יישומים של DMEM
- לחקור את יכולת יצירת הפלאק של נגיף הפוליומה בתאי עוברי עכברים.
- במחקרי עיכוב מגע.
- במחקר וניתוח תרביות תאי עוף.
מהם הדמיון בין RPMI ל-DMEM?
- הן RPMI והן DMEM משמשות בתרבית תאים של בעלי חיים.
- הן מדיית RPMI והן DMEM הן ניסוחים נוזליים.
- הן מדיית RPMI והן DMEM מכילות את חומצות האמינו החיוניות, הוויטמינים והמלחים האנאורגניים הדרושים לצמיחה.
- הן המדיה RPMI והן DMEM אינן שלמות. לכן, יש להוסיף סרום.
- הן מדיית RPMI והן DMEM משתמשות בגלוקוז כמקור הפחמן שלה.
- למדיה RPMI וגם DMEM יש pH גבוה יותר.
מה ההבדל בין RPMI ל-DMEM?
RPMI לעומת DMEM |
|
| RPMI הוא מדיום בשימוש נרחב להתרבות תאי יונקים בתרבית תרחיף. | DMEM הוא סוג שונה של מדיום בסיסי עם ריכוזי חומצות אמינו וויטמינים מוגברים. |
| נוכחות של פוספטים נוספים | |
| נוכח ב-RPMI. | נעדר ב-DMEM. |
| השתמש | |
|
משמש לתרבית תאים בתרבויות נצמדות. זה רגיל,
|
| סוגי תרבות | |
| RPMI משמש לתרביות השעיה. | DMEM משמש לתרביות עם תאים מודבקים. |
סיכום – RPMI לעומת DMEM
הן RPMI והן DMEM נמצאות בשימוש נרחב בגידול תאים בבעלי חיים במיוחד להתרבות שורות תאים של בעלי חיים כולל לימפוציטים במבחנה. DMEM הוא מדיום בסיסי שונה שבו יש ריכוז תזונה מוגבר. RPMI שפותח על ידי Roswell Park Memorial Institute, והוא גם מדיום המשמש בגידול תאי בעלי חיים במיוחד עבור לימפוציטים של יונקים.שתי המדיה זמינות מסחרית. זה ההבדל בין RPMI ל-DMEM.
