ההבדל העיקרי בין Pour plate ל-Spread plate הוא שנפח ידוע של הדגימה נמרח על פני השטח של מדיום האגר בצלחת הממרח, בעוד שבצלחת המזיגה, נפח ידוע של הדגימה מעורבב עם אגר ולאחר מכן שפכו לצלחת. כאשר משווים את הדיוק של שתי הטכניקות הללו, לצלחת המזיגה יש דיוק גבוה יותר מצלחת הממרח.
שיטת ספירת צלחות סטנדרטית היא גישה מבוססת צמיחה שסופרת את מספר המיקרואורגניזמים החיים (הגדלים/ניתנים לעיבוד/כדאיים) בתוך דגימה. זוהי שיטה רבת עוצמה בשימוש, בתחומים מיקרוביולוגיים רבים לנתח את מספר המיקרואורגניזמים החיים.תחומים כגון מזון ומוצרי חלב, רפואה, סביבה, מים וחקלאות, גנטיקה מיקרוביאלית, מיקרוביולוגיה מולקולרית, פיתוח אמצעי גידול וביוטכנולוגיה (טכנולוגיית ביוריאקטור, תסיסה, טיפול בפסולת/שפכים וכו') משתמשים בטכניקה זו. יתרה מזאת, ישנן שתי דרכים עיקריות לבצע ספירת צלחות סטנדרטית: הן, טכניקת צלחות מפוזרות וטכניקת צלחות לשפוך.
מה זה Pour Plate?
טכניקת צלחת לשפוך היא שיטה מיקרוביאלית למנות כמה תאים ברי קיימא שנמצאים בדגימה. המומחיות של שיטת הצלחת לשפוך היא שנפח ידוע של הדגימה מעורבב תחילה עם אגר ולאחר מכן יוצקים לצלחת.
איור 01: יוצקים צלחת
צעדים אחרים דומים לטכניקת צלחת הפריסה הנדונה בסעיף הבא.השלב הבא לאחר יציקת האגר המעורבב עם הדגימה הוא לאפשר לו להתמצק ולדגור. לאחר הדגירה, ספירת מספר המושבות הקיימות חיונית כדי לחשב את ה-CFU הסופי עבור 1 גרם או 1 מ ל.
מה זה Spread Plate?
לוחית התפשטות היא טכניקה למנות תאים ברי קיימא בדגימה. עבור טכניקה זו, יש צורך בדילול סדרתי לדגימה כדי להבטיח שלפחות אחת תוליד מספר מושבות שניתן לספור. התהליך כאן הוא לבצע פיפטה של נפח מוגדר של דילול על פני השטח של צלחת אגר ולפזר אותו במהירות ובאופן שווה על פני משטח אגר בעזרת מפזר זכוכית, שהודלק ומקורר באלכוהול. ביצוע השכפולים הכרחי כדי לקבל ערך ממוצע אמין. השלב הבא הוא לייבש את הצלחות הללו לתקופה קצרה, ולאחר מכן להפוך ולהניח אותן באינקובטור בטמפרטורה מתאימה לצמיחה ולתקופת דגירה מוגדרת.
איור 02: צלחת פרוסה
לאחר הדגירה, בדיקת הצלחות תראה את הגידול. בדילול אחד או יותר, מספר התאים הקיימים בחומרי החיסון (למשל 100 או 200μl) יובילו ל-30 עד 300 מושבות נפרדות על פני האגר. פחות מ-30 ספירות של מושבות אינן אמינות סטטיסטית. קשה למנות ספירות מעל 300 ונוטים לטעות.
מה הם קווי הדמיון בין צלחת לשפוך לצלחת מרוחה?
- לפזר צלחת וצלחת לשפוך הן שתי טכניקות להשגת מספר תאים ברי קיימא הקיימים בדגימה.
- שתיהן שיטות ישרות.
- שגיאות דגימה יכולות להתרחש בשתי השיטות.
- הגבלות של תנאי הגדילה משפיעות על התוצאה של שתי השיטות.
- שגיאות טכניות עלולות גם להפריע לתוצאה הסופית של שתי השיטות.
- למרות שהן קיימות, שתי השיטות אינן בשימוש לגידול חיידקים בלתי ניתנים לתרבות.
מה ההבדל בין צלחת למזוג לצלחת מרוחה?
צלחת לשפוך היא טכניקה מיקרוביאלית למנות מספר תאים ברי קיימא בדגימה. טכניקת צלחת התפשטות היא טכניקה נוספת למנות את החיידקים הגדלים על פני המדיה. בטכניקת צלחת לשפוך, התהליך הוא להוסיף את המדגם על משטח המדיום המוצק על הצלחת לשפוך. אבל, בטכניקת ה-Spred Plate, התהליך הוא לערבב את המדגם עם האגר המותך ואז לשפוך אותו לתוך הצלחת.
בהתייחס לדיוק של שתי הטכניקות הללו, לצלחת המזיגה יש דיוק גבוה יותר מהצלחת הממרח. יתרה מכך, שלא כמו בצלחת מזיגה, מפזר זכוכית משמש לפיזור הדגימה באופן שווה על פני השטח על צלחת ממרח. יתרה מכך, באמצעות פלטת מזיגה, ניתן למנות את האירובים, האנאירובים והאנאירובים הפקולטטיביים. עם זאת, באמצעות צלחת הפריסה ניתן למנות רק את האירובים.יתר על כן, צלחות אגר מוצקות נחוצות לביצוע צלחת פיזור בעוד שאמצעי אגר מותך נוזלי נחוצים לשיטת היציקה.
סיכום – צלחת לשפוך לעומת צלחת מריחה
צלחת לשפוך וצלחת להפיץ הן שתי טכניקות במיקרוביולוגיה כדי להקל על ספירת תאים מיקרוביאליים בדגימה. שתי השיטות מבוססות צמיחה ומכאן, למדוד את התאים הקיימאים. במהלך צלחת המזיגה מערבבים נפח ידוע של הדגימה עם האגר המותך ויוצקים לצלחת. במהלך צלחת ההפצה, נפח ידוע נמרח על פני המדיום של האגר המוצק. זה ההבדל בין צלחת לשפוך לצלחת ממרח.
