ההבדל העיקרי בין ספירת תאים כוללת לספירת תאים ברי קיימא הוא שספירת התאים הכוללת מעריכה את כל התאים, כולל תאים מיקרוביאליים חיים ומתים בדגימה, בעוד שספירת תאים קיימא מעריכה רק את התאים המיקרוביאליים החיים בדגימה.
ספירת מספר האורגניזמים בתוך אוכלוסיה נחשבת הכרחית לרוב עבודות הניסוי. לכן, אנו מנסים לנתח את מספר החיידקים בתוך מדגם באמצעות שיטות ישירות ועקיפות. מדידות ישירות כוללות שיטות שסופרות מספרי תאים ישירות. מדידות עקיפות כוללות מדידת פרמטר כלשהו שיכול להיות קשור למספר תאים כמו צפיפות תאים, משקל יבש וכו'.שיטות מסוימות מכמתות רק את התאים המיקרוביאליים החיים בדגימה. ספירת תאים ברי קיימא היא שיטה כזו. ספירה מיקרוסקופית ישירה מכמתת את כל התאים בנפח ידוע של מדיום/דגימה באמצעות מיקרוסקופ. לכן, הוא סופר תאים חיים ומתים כאחד. זהו סוג של ספירת תאים כוללת.
מהי ספירת התא הכוללת?
ספירת תאים כוללת היא השיטה הכוללת ספירה של כל התאים בנפח ידוע של מדיום/דגימה באמצעות מיקרוסקופ ותא ספירה (המוציטומטר). שלא כמו ספירות קיימות, הן תאים חיים והן תאים מתים נספרים. לכן, זוהי ספירה כוללת אלא אם כן מוחל כתם כדאיות במהלך התצפית. במיקרוסקופיה, התאים נצפים ישירות מתחת למיקרוסקופ וסופרים אותם. הוא משתמש בתרחיף תאים המורכב מתאי חיידקים. לקלות הספירה והמדידות המדויקות, ניתן לבצע דילול של הדגימה. בריכוזים גבוהים/נמוכים מאוד של תאים, השגת ספירת התאים הכוללת באמצעות מיקרוסקופ היא משימה קשה.
איור 01: תא ספירה – Hemocytometer
תאי הספירה קלים, זולים ומהירים בספירת תאים כוללת. והכי חשוב, תאי ספירה שימושיים לספירת איקריוטים וגם פרוקריוטים. אנו סופרים תאים בריבועים נבחרים בנפח ידוע כדי לכמת את ספירת התאים הכוללת.
מהי ספירת תאים קיימא?
ספירת תאים חיים היא שיטה לספירת תאים מיקרוביאליים חיים בדגימה. זה סופר רק תאים חיים בדגימה. ספירת צלחות קיימא, סינון ממברנה והמספר הסביר ביותר הם מעט טכניקות ספירת תאים קיימא. גישות אלו מבוססות צמיחה. שיטת ספירת הצלחות הקיימת היא שיטה רבת עוצמה המשמשת בתחומים מיקרוביולוגיים רבים, כולל מיקרוביולוגיה של מזון ומוצרי חלב, מיקרוביולוגיה רפואית, מיקרוביולוגיה סביבתית, גנטיקה מיקרוביאלית, פיתוח אמצעי גידול וביוטכנולוגיה.
הדרך הנפוצה ביותר לספור חיידקים ברי קיימא היא להשתמש בדגימה המסוגלת ליצור מושבות על מדיום אגר. ישנן שתי דרכים עיקריות לבצע ספירת צלחות: טכניקת צלחת ממרח וטכניקת צלחות מזיגה. ניתן למרוח נפח ידוע של דגימה על פני השטח של צלחת אגר, או לערבב לתוך האגר. לאחר מכן מדגרים את הצלחת, וסופרים את המושבות המתעוררות. מספר המושבות קשור למספר המיקרואורגניזמים בתוך המדגם המקורי. ספירות קיימות מודדות רק את התאים החיים וגדלים.
איור 02: ספירת צלחות קיימות
המספר הסביר ביותר (MPN) הוא חלופה לשיטות ספירת צלחות להערכת צפיפות האוכלוסייה של תאים ברי קיימא. היא סופרת אורגניזמים הגדלים בתרבית נוזלית ולכן היא טכניקה בקטריולוגית בעיקרה.זה שימושי במיוחד עבור ריכוזים נמוכים של אורגניזמים, למשל. חלב, מים לשתיה.
טכניקת סינון ממברנה מתאימה יותר כאשר החיידקים מדוללים מאוד כמו באספקת המים של העיר. זה נעשה פשוט על ידי העברת נפח ידוע של הנוזל דרך מסנן ודגירה שלו על מצע מזין. מושבות המתפתחות על המסנן נספרים, ומחושבים את החיידקים למיליליטר של הדגימה.
מהם הדמיון בין ספירת תאים כוללת לספירת תאים קיימא?
- ספירת תאים כוללת וספירת תאים ברי קיימא הם שני סוגים של טכניקות מיקרוביאליות המכימות תאים.
- הן נפוצות בשימוש בטכניקות ספירה במעבדות מיקרוביולוגיה.
מה ההבדל בין ספירת תאים כוללת לספירת תאים קיימא?
ספירת התאים הכוללת מונה את כל התאים החיידקיים החיים והמתים בדגימה. לעומת זאת, ספירת תאים ברי קיימא מונה רק את התאים החיים בדגימה.אז זה ההבדל העיקרי בין ספירת תאים כוללת לספירת תאים ברי קיימא. ספירת התאים הכוללת אינה תלויה בצמיחת מושבות על לוחות אגר בעוד שספירת תאים ברי קיימא היא טכניקה המבוססת על גדילה והיא תלויה בצמיחה של מושבות מיקרוביאליות על לוחות אגר.
גרפיקת המידע שלהלן מסכמת את ההבדל בין ספירת התאים הכוללת לספירת תאים ברי קיימא.
סיכום – ספירת תאים כוללת לעומת ספירת תאים קיימא
ספירת התאים הכוללת מונה תאים חיים ותאים מתים של חיידקים, בעוד שספירת תאים ברי קיימא מונה רק את התאים החיים. לפיכך, זהו ההבדל העיקרי בין ספירת תאים כוללת לספירת תאים ברי קיימא. כמו כן, ספירת תאים ברי קיימא היא טכניקה מבוססת צמיחה, בניגוד לספירת תאים כוללת.יתר על כן, זה דורש דגירה של צלחות עד קבלת המושבות הנראות לעין. ספירת לוחות קיימא, MPN וסינון ממברנה הן מעט טכניקות של ספירת תאים ברי קיימא בעוד שמיקרוסקופיה ישירה והשימוש בהמוציטומטר הן שתי טכניקות של ספירת תאים כוללת.
