ההבדל העיקרי בין RIA ו-ELISA הוא שבדיקת רדיואימונית (RIA) היא טכניקת בדיקת אימונו המשתמשת ברדיואיזוטופים כדי לזהות קומפלקסים של אנטיגן-נוגדנים, בעוד שבדיקת אימונוסורבנטית מקושרת אנזים (ELISA) היא טכניקת בדיקת אימונו שמשתמשת באנזימים לאיתור אנטיגן -תסביכי נוגדנים.
זיהוי של חלבונים ספציפיים כגון אנטיגנים חשוב ביותר באבחון מחלה. לכן, RIA ו-ELISA הן שתי טכניקות של בדיקות אימונו המשמשות במעבדות לאיתור חלבונים ספציפיים במהירות, במיוחד אנטיגנים. בדרך כלל, נוגדן ספציפי נקשר לאנטיגן היעד ויוצר קומפלקס גלוי המכונה פרסיפיטין.ניתן לזהות קומפלקסים של נוגדנים ואנטיגנים אלה באמצעות טכניקות שונות. הטכניקה של זיהוי קומפלקס אנטיגן-נוגדנים באמצעות שימוש ברדיואיזוטופים ידועה בשם RIA, והטכניקה של זיהוי קומפלקס אנטיגן-נוגדנים באמצעות אנזימים ידועה בשם ELISA.
מה זה RIA?
Radioimmunoassay (RIA) היא טכניקת בדיקת אימונו המזהה קומפלקסים של אנטיגן ונוגדנים באמצעות רדיואיזוטופים. רוזלין זוסמן יאלו פיתחה טכניקה זו בשנת 1960 בעזרתו של סולומון ברסון. על התגלית המדהימה הזו, זכתה רוזלין זוסמן יאלו בפרס נובל לרפואה בשנת 1977. בדרך כלל, בבדיקות רדיואימוניות, כמות ידועה של אנטיגן הופכת לראשונה לרדיואקטיבית טכניקה זו משתמשת לעתים קרובות באיזוטופים רדיואקטיביים גמא של יוד, הנקראים 125-I, לתיוג אנטיגנים. רדיואיזוטופים אלה נצמדים בדרך כלל לחומצת האמינו טירוזין של האנטיגן. לאחר מכן מערבבים את האנטיגן המסומן ברדיו עם נוגדן. כתוצאה מכך, האנטיגן והנוגדן המסומנים ברדיו נקשרים זה לזה באופן ספציפי.
מאוחר יותר מתווספת דגימת סרום המכילה כמות לא ידועה של אותו אנטיגן. זה גורם לאנטיגן הלא מסומן מהנסיוב להתחרות עם האנטיגן המסומן ברדיו על אתרי קשירה של נוגדנים. ככל שריכוז האנטיגן הלא מסומן עולה, יותר ממנו נקשר לנוגדן, ומחליף את הגרסה המסומנת רדיואקטיבית. לפיכך, הוא מפחית את היחס בין אנטיגן מסומן רדיואקטיבי הקשור לנוגדנים לאנטיגן רדיוסייג חופשי. בסוף ההליך, האנטיגנים הקשורים מופרדים. בסופו של דבר, הרדיואקטיביות של אנטיגנים חופשיים בסופרנטנט שנותר נמדדת באמצעות מונה גמא.
מה זה ELISA?
ELISA היא טכניקת בדיקת אימונו המזהה קומפלקסים של אנטיגן ונוגדנים באמצעות אנזימים. זהו מבחן אנליטי ביוכימי שתואר לראשונה על ידי Engvall ו-Perlmann בשנת 1971. ברוב הצורות הפשוטות של טכניקות ELISA, אנטיגנים של דגימת המטופל מחוברים למשטח מוצק. לאחר מכן מורחים נוגדן תואם על פני השטח, כך שהוא יכול להיקשר לאנטיגן.
איור 01: ELISA
נוגדן מסוים זה מקושר לאנזים. מאוחר יותר, כל נוגדנים לא קשורים מוסרים על ידי כביסה עם חומר ניקוי. בשלב האחרון של טכניקה זו, מוסיפים את המצע של האנזים. אם יש קשירה נכונה של אנטיגן ונוגדן, התגובה הבאה מייצרת אות צבע שניתן לזהות, לרוב שינוי צבע.
מהם הדמיון בין RIA ו-ELISA?
- RIA ו-ELISA הן טכניקות של בדיקות חיסוניות.
- לשתי הטכניקות יש יצירת קומפלקס של אנטיגן ונוגדנים.
- ניתן להשתמש בטכניקות אלה כדי לזהות חלבונים לא ידועים בדגימות.
- שניהם משמשים לאבחון מחלות במעבדות.
- שתיהן טכניקות מאוד ספציפיות ורגישות.
מה ההבדל בין RIA ל-ELISA?
RIA היא טכניקת בדיקת אימונו לזיהוי קומפלקס אנטיגן-נוגדנים באמצעות שימוש ברדיואיזוטופים. ELISA היא טכניקת בדיקת אימונו לזיהוי קומפלקס אנטיגן-נוגדנים באמצעות אנזימים. אז זה ההבדל העיקרי בין RIA ל-ELISA. יתרה מכך, בטכניקת RIA, האנטיגן מסומן, אך ב-ELISA, הנוגדן מסומן. יתר על כן, בטכניקת RIA, מולקולות תיוג הן רדיואיזוטופים, בעוד שב-ELISA, מולקולות תיוג הן אנזימים. לפיכך, זהו הבדל נוסף בין RIA ל-ELISA.
האינפוגרפיה שלהלן מציגה הבדלים נוספים בין RIA ו-ELISA בצורת טבלה.
סיכום – RIA נגד ELISA
מבחני חיסון ממלאים תפקיד חשוב מאוד במסגרות ביואנליטיות שונות, כגון אבחון קליני, ניתוח ביו-פרמצבטי, ניטור סביבתי, אבטחה ביולוגית ובדיקות מזון.מאז שנות ה-60 פותח מגוון רחב של מבחני חיסון. RIA ו-ELISA הן שתיהן טכניקות של בדיקת אימונו. RIA היא טכניקת בדיקת אימונו לזיהוי קומפלקס אנטיגן-נוגדנים באמצעות שימוש ברדיואיזוטופים. ELISA היא טכניקת בדיקת אימונו לזיהוי קומפלקס אנטיגן-נוגדנים באמצעות אנזימים. לפיכך, זהו סיכום ההבדל בין RIA ו-ELISA.
