ההבדל העיקרי בין בדיקה רדיואימונית לבדיקה אימונורדיומטרית הוא שבבדיקה רדיואימונית, הדגימה או התרכובת הנמדדת משולבת עם אנטיגן רדיואקטיבי לפני השילוב, בעוד שבניסוי האימונורדיומטרי, הדגימה או התרכובת מתחברים מיד עם הרדיואקטיבי. נוגדנים.
בדיקת אימונו היא בדיקה ביוכימית המזהה נוכחות או ריכוז של מקרומולקולות בתמיסה באמצעות נוגדן או אנטיגן. נוגדנים פלואורסצנטיים ורדיואקטיביים משמשים למדידת אנטיגנים בדגימה. בתחילה, נוגדנים שימשו בטכניקות משקעים כגון משקעים חיסוניים, אימונודיפוזיה ואלקטרופורזה חיסונית לצורך ניתוח חלבון בסרום.נכון לעכשיו, נעשה שימוש בטכניקות רגישות ביותר כגון בדיקות רדיואימוניות ובדיקות אימונורדיומטריות למדידת תרופות, סמני גידול והורמונים.
מהו בדיקת Radioimmunoassay?
Radioimmunoassay (RIA) הוא בדיקה חיסונית המשתמשת ביסודות רדיואקטיביים ביצירת קומפלקסים של אנטיגן-נוגדנים. RIA משתמשת בדרך כלל בנוגדנים רדיואקטיביים כדי לזהות את כמות האנטיגן בדגימה. RIA הוא בדיקה מאוד ספציפית ורגישה מאוד במבחנה. העיקרון מאחורי RIA הוא מחייב תחרותי. כאן, אנטיגן רדיואקטיבי מתחרה נגד אנטיגן לא רדיואקטיבי על כמות קבועה של אתרי קשירה של נוגדנים או קולטן. RIA דורש רישיון מיוחד ואמצעי זהירות מכיוון שמשתמשים בחומרים רדיואקטיביים, והיא נותרה בין הטכניקות הזולות ביותר.
איור 01: Immunoassay
במהלך RIA, כמות ידועה של אנטיגן נעשית רדיואקטיבית לעתים קרובות על ידי תיוג שלה עם איזוטופים רדיואקטיביים גמא של יוד המחוברים לטירוזין. אז אנטיגן זה משולב עם כמות ידועה של נוגדן. כאן, גם אנטיגן וגם נוגדן נקשרים זה לזה באופן ספציפי. לאחר מכן, מוסיפים דגימת סרום דם כדי ליזום תגובה תחרותית בין האנטיגנים המסומנים לאנטיגנים הלא מסומנים בסרום עם נוגדנים ספציפיים. בתגובה זו, נוגדנים משחררים כמות מסוימת של אנטיגן מסומן. כמות זו היא פרופורציונלית ליחס בין אנטיגן מסומן לבלתי מסומן. לבסוף, נוצרת עקומת קשירה כדי להסיק את כמות האנטיגן בסרום הדם של המטופל.
מהו בדיקה אימונורדיומטרית?
assay immunoradiometric (IRMA) הוא בדיקה חיסונית המשתמשת בנוגדנים מסומנים רדיואקטיביים. ב-IRMA, הנוגדנים מסומנים באמצעות רדיואיזוטופים. נוגדנים אלו נקשרים לאנטיגנים הנמצאים בדגימה ספציפית.במדגם חיובי, נוגדנים המסומנים רדיואקטיבית נקשרים לאפיטופים החופשיים של אנטיגנים. זה יוצר קומפלקס אנטיגן-נוגדנים.
במהלך התגובה השנייה, הנוגדנים המסומנים שאינם קשורים מוסרים באמצעות אנטיגן פאזה מוצקה. מספר הנוגדנים הרדיואקטיביים הנותר בתמיסה הוא פונקציה ישירה של ריכוז האנטיגן. IRMA ידוע בתור מבחן ריאגנטים עודף שבו כמות עודפת של נוגדן מסומן רדיו משמשת כמגיב. כאן, ריכוז עודף של נוגדן או אנטיגן מסומן מותר להגיב. כשלב הסופי, הנוגדנים הקשורים לאנטיגן והנוגדנים החופשיים מופרדים, והחלק הכרוך באנטיגן נתון למבחנים רדיואקטיביים. כאן, הפעילות של השבר עומדת ביחס ישר לריכוז האנטיגן.
מהם הדמיון בין בדיקה רדיואימונית לבדיקה אימונורדיומטרית?
- הן בדיקות רדיואימוניות והן בדיקה אימונורדיומטרית הן מבחני אימונו המשתמשים ביסודות רדיואקטיביים ביצירת קומפלקסים של אנטיגן-נוגדנים.
- הם יוצרים קומפלקס אנטיגן-נוגדנים.
מה ההבדל בין בדיקה רדיואימונית לבדיקה אימונורדיומטרית?
Radioimmunoassay הוא בדיקת אימונו הקובעת את רמות הנוגדנים על ידי אנטיגן המסומן ברדיואיזוטופ בעוד שבדיקה אימונורדיומטרית היא בדיקת ריאגנטים עודפת המשתמשת בריכוז עודף של נוגדן מסומן רדיואקטיבית. לפיכך, זהו ההבדל העיקרי בין בדיקה רדיואימונית לבדיקה אימונורדיומטרית. IRMA מסוגל לספק רגישות גבוהה יותר מאשר RIA. ב-RIA, אנטיגנים מסומנים עם איזוטופים רדיואקטיביים גמא של יוד ואילו ב-IRMA נוגדנים מסומנים באמצעות איזוטופים של יוד. אז זה גם הבדל בין בדיקה רדיואימונית לבדיקה אימונורדיומטרית. מכיוון ש-IRMA היא טכניקת ריאגנטים עודפת, הבדיקה מבוצעת בזמן קצר יותר מ-RIA.
הטבלה הבאה מסכמת את ההבדלים בין בדיקה רדיואימונית לבדיקה אימונורדיומטרית.
סיכום – בדיקה רדיואימונית לעומת בדיקה אימונורדיומטרית
Radioimmunoassay הוא בדיקה חיסונית המשתמשת ביסודות רדיואקטיביים בהיווצרות צעדים כדי לקבוע רמות נוגדנים. RIA משתמש בדרך כלל בנוגדנים רדיואקטיביים. אנטיגן רדיואקטיבי מתחרה נגד אנטיגן לא רדיואקטיבי על כמות קבועה של אתרי קישור של נוגדנים או קולטן. הבדיקה האימונורדיומטרית היא בדיקת אימונו המבוצעת כדי לקבוע את רמות האנטיגן של דגימה באמצעות נוגדנים מסומנים רדיואקטיביים. נוגדנים אלו נקשרים לאנטיגנים הנמצאים בדגימה ספציפית. בסוף כל בדיקה, נוצר קומפלקס אנטיגן-נוגדנים. על מנת לקבל את תוצאות המבחנים, מציירים עקומת מחייבת. בבדיקה רדיואימונית, כמות האנטיגן המסומנת היא פרופורציונלית ליחס בין אנטיגן מסומן לאנטיגן שאינו מסומן, אך בבדיקה אימונורדיומטרית, הפעילות של החלק הקשור לאנטיגן עומדת ביחס ישר לריכוז האנטיגן. זהו סיכום ההבדל בין בדיקה רדיואימונית לבדיקה אימונורדיומטרית.
