ההבדל העיקרי בין בדיקה קולורימטרית לפלואומטרית הוא שבדיקה קולורימטרית קובעת את הריכוז של תרכובות צבעוניות בתמיסה בעוד שבדיקה פלואומטרית קובעת את המנגנון הקינטי של תמיסה.
בדיקה ביוכימית היא טכניקה המזהה או מכמתת את הפעילות של מולקולה או חומר ביולוגיים בצורה אנליטית. זהו תהליך במבחנה. בדיקה קולורימטרית ובדיקה פלואומטרית הם שני סוגים של מבחני ביוכימיים נפוצים המבוצעים במעבדות. טכניקות מרובות כגון ELISA ו-Western blotting הן גם מבחני ביוכימיים מורכבים לכימות פעילות מטבולית ולמדידה של ההתנהגות התפקודית של ביומולקולות כגון חלבונים, אנזימים ומולקולות קטנות אחרות.סוגים אלה של מבחנים משמשים לזיהוי של אינטראקציות חלבון-DNA, חלבון-RNA וחלבון-חלבון.
מהו בדיקה קולורימטרית?
בדיקה קולורימטרית היא טכניקה הקובעת את ריכוז התרכובות הצבעוניות בתמיסה. במילים אחרות, בדיקה קולורימטרית היא תגובה שמובילה לשינוי צבע עקב תגובה אנזימטית או כימית בין ריאגנטים לאנליטים. מבחנים קולורימטריים מתורגלים בביוכימיה כדי לבדוק אנזימים, תרכובות ספציפיות, הורמונים, נוגדנים ואנליטים אחרים. הם משתמשים בקולורימטרים או בספקטרופוטומטרים. קולורימטרים הם מכשירים המאפיינים דוגמאות צבעוניות על מנת לספק מדד אובייקטיבי של מאפייני הצבע. ספקטרופוטומטר הוא מכשיר שמודד את עוצמת האור כפונקציה של הצבע או אורך הגל של האור.
איור 01: בדיקה קולורימטרית
איך מבחן קולורימטרי עובד?
בבדיקה קולורימטרית, מכינים צלחת עם נוגדן מסוים הקשור לבארות. לאחר מכן מוסיפים את המדגם. זה עשוי לאפשר לדגימה להיקשר לנוגדן. לאחר מכן מוסיפים לבארות נוגדן זיהוי ומצע כדי להגיב עם בדיקת הזיהוי. תמיסת עצור מתווספת בסוף לפני הקריאה. באר ריקה הנקראת ריק נשארת ללא הדגימה. בבדיקה הקולורימטרית, ככל שהצבע כהה יותר, כך ריכוז האנליטים גדול יותר. בדרך כלל, יש צורך באורך גל אחד בלבד כדי לבצע את הקריאה. אבל אם יש מדידת ייחוס, נעשה שימוש בשני אורכי גל או יותר.
מהו בדיקה פלואורומטרית?
הבדיקה הפלואומטרית היא טכניקה הקובעת את המנגנון הקינטי של תגובות האנזים. בדיקה פלואורומטרית מתרחשת עם היווצרות של תוצר פלואורסצנטי ממצע לא פלואורסצנטי או להיפך.בדיקה זו עושה שימוש גם בהעברת אנרגיית תהודה פלואורסצנטית (FRET) שבה התגובה האנזימטית משנה את מיקומם של שני פלואורפורים במצע ובכך משנה את עוצמת הקרינה.
איור 02: בדיקה פלואורומטרית
מבחנים פלואורומטריים הם בדרך כלל הרבה יותר רגישים ממבחנים אחרים. הערכות האנזים האבחנתיות בדגימות רקמה, תאים או נוזלים של חולים גדלות עקב רגישותו הגבוהה יותר.
איך עובד בדיקה פלואורומטרית?
בבדיקה פלואורומטרית, מוסיפים מצע לדגימה בצלחת, ותגובת הקרינה נלקחת באמצעות קורא הלוחות. כאן, כל תא נמדד בנפרד. לוחות אטומים משמשים בבדיקות פלואומטריות. זה מפחית את פיזור האור.שני אורכי גל נחוצים עבור סוג זה של בדיקה. אורך גל אחד מיועד לזהות את העירור ואורך הגל השני מיועד לפליטה.
מהם הדמיון בין בדיקה קולורימטרית לפלואורומטרית?
- ניסוי קולורימטרי ובדיקה פלואומטרית הם שני סוגים של מבחני ביוכימיים.
- שני המבחנים מבוצעים לאבחון רפואי.
- מבחנים אלה כוללים תגובה אנזימטית.
- שני המבחנים כוללים מצע ואנליטים.
מה ההבדל בין בדיקה קולורימטרית לפלואורומטרית?
בדיקה קולורימטרית היא טכניקה הקובעת את ריכוז התרכובות הצבעוניות בתמיסה, בעוד שבדיקה פלואומטרית היא טכניקה הקובעת את המנגנון הקינטי של תגובות האנזים. אז זה ההבדל העיקרי בין בדיקה קולורימטרית לפלואומטרית. יתר על כן, המבחנים הפלואומטריים רגישים יותר מהמבחנים הקולורימטריים; לפיכך, לבדיקות פלואומטריות יש את היכולת לזהות יותר אנליטים.לפיכך, זהו הבדל חשוב נוסף בין בדיקה קולורימטרית לפלואומטרית. יתר על כן, מבחני פלואומטרי דורשים שני אורכי גל, בעוד מבחני קולורימטריים מבוצעים עם אורך גל אחד.
האינפוגרפיקה למטה מציגה הבדלים נוספים בין בדיקה קולורימטרית לבדיקה פלואומטרית.
סיכום – מבחן קולורימטרי לעומת פלואורומטרי
ניסוי ביוכימי הוא תהליך אנליטי המשמש לקביעה ולכימת תגובות מטבוליות תאי. בדיקה קולורימטרית ובדיקה פלואומטרית הם שני סוגים של מבחני ביוכימיים. בדיקה קולורימטרית היא תגובה שמובילה לשינוי צבע עקב תגובה אנזימטית או כימית בין ריאגנטים ואנליטים בעוד שבדיקה פלואומטרית היא טכניקה המשמשת לקביעת המנגנון הקינטי של תגובות האנזים. שני המבחנים תלויים בתגובה אנזימטית הכוללת מצע ואנליטי. מבחני פלואורומטרי רגישים יותר מבחני קולורימטריים. והכי חשוב, מבחני פלואומטריים דורשים שני אורכי גל, בעוד שמבחנים קולורימטריים יכולים להתבצע עם אורך גל אחד בלבד.לפיכך, זה מסכם את ההבדל בין בדיקה קולורימטרית לבדיקה פלואומטרית.
