הבדל בין CFU ל-MPN

2024 מְחַבֵּר: Alex Aldridge | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-17 13:39

הבדל מפתח – CFU לעומת MPN

יחידה יוצרות מושבות (CFU) ומספר סביר ביותר (MPN) הן שתי שיטות המשמשות לספירת מיקרואורגניזמים בדגימות. שני הפרמטרים משמשים לאיתור איכות המים וחיידקי אינדיקטור צואה בדגימות מים. יחידת יצירת מושבות היא מדד המשמש למנות את מספר תאי חיידקים או תאי פטרייה ברי קיימא בנפח או במשקל ספציפי של דגימה נתונה. היחידה הסטנדרטית עבור פרמטר זה היא CFU/ml או CFU/g. המספר הסביר ביותר הוא יחידה נוספת המשמשת למדידת מספר תאי חיידקים ברי קיימא בדגימה נוזלית. ההבדל העיקרי בין CFU ל-MPN הוא ש-CFU מחושב ממושבות החיידקים והפטריות הגדלות על צלחת אגר מוצק ואילו MPN מחושב מחיידקים ברי קיימא הגדלים במדיום נוזלי.

מה זה CFU?

יחידה יוצרות מושבות (CFU) הוא פרמטר שמודד את מספר תאי חיידקים או פטריות ברי קיימא בדגימה נתונה. השיטה הסופרת יחידות יוצרות מושבות מכונה ספירת צלחות סטנדרטית. המושבות הקיימות המופיעות על לוחות האגר מבוטאות כ-CFU ל-1 מ ל (יחידה יוצרת מושבה למיליליטר) של הדגימה לנוזלים או CFU ל-1 גרם (יחידה יוצרת מושבה לגרם אחד) של הדגימה למוצקים.

ישנן שתי שיטות נפוצות המשמשות למדידת CFU במדגם. הם שיטת צלחת מרוחה ושיטת צלחת לשפוך. שתי שיטות אלו נתמכות על ידי טכניקה הנקראת דילול סדרתי. דגימות מדוללות סדרתי מאפשרות השגת מספר ניתן לספור של מושבות על פני האגר. ניתן לפזר נפח ידוע של דגימה על פני השטח של צלחת אגר, או לערבב עם אגר ולשפוך על צלחת. לאחר מכן מדגרים את הצלחת וסופרים את המושבות המתעוררות. מספר המושבות מתייחס למספר המיקרואורגניזמים בתוך המדגם המקורי.הלוחות המציגים יותר מדי מושבות או מעט מדי מושבות אינן נכללות בספירה מכיוון שהתוצאות עשויות שלא להיות מדויקות סטטיסטית על הלוחות הללו. סטטיסטית, הטווח הטוב ביותר הוא 30 - 300 מושבות על צלחת אגר. לפיכך, יש לבחור את הלוחות הנכונים לספירה מדויקת. דילול סדרתי מתבצע עבור הפונקציה לעיל.

לאחר שסופרים את מספר המושבות הקיימות בצלחות, ניתן לחשב CFU/ml באמצעות המשוואה הבאה.

CFU למ ל של דגימה מקורית=מספר המושבות בצלחת X מקדם דילול

גורם דילול=(1/ דילול של הצלחת)

לדוגמה, אם אתה מקבל 149 מושבות על הצלחת של דילול 10^{-4, אז ניתן לחשב את מספר החיידקים ב-1 מ ל מהדגימה המקורית באופן הבא:}

CFU/ml=(149) x (1/10^-4)

=149 × 10^{4 או 1490000}

=1. 49 x 10⁶

איור 01: יחידה ליצירת מושבות

מה זה MPN?

המספר הסביר ביותר הוא מדד חלופי ל-CFU/ml. MPN גם מעריך את התאים הקיימאים בדגימה נוזלית. היא סופרת אורגניזמים הגדלים בתרבית נוזלית והיא טכניקה בקטריולוגית בעיקרה. שיטה זו שימושית במיוחד עבור דגימות המכילות ריכוז נמוך של תאי חיידקים; לדוגמה, חלב, מי שתייה וכו'. ערך MPN מבוטא עבור 100 מ"ל של נפח. MPN מסתמך על שיטה סטטיסטית המבוססת על תורת ההסתברות. ישנן טבלאות סטטיסטיות שנועדו למצוא ערכי MPN לכל 100 מ"ל של הדגימה. טבלאות אלו מציגות את התוצאות בגבולות ביטחון של 95%.

ערך MPN מחושב לאחר ביצוע טכניקה הנקראת שיטת תסיסה מרובת צינורות. שלוש סטים של צינורות המכילים מצע תרבות מתאים מחוסנים בשלושה נפחים שונים של הדגימה כגון 10 מ"ל, 1 מ"ל ו-0.1 מ"ל ודגירה לגידול. לאחר תקופת הדגירה, הצינורות מקבלים ניקוד + (חיובי) או – (שלילי) עבור נוכחות או היעדר צמיחה. לאחר מכן משווים דפוס התוצאות החיוביות והשליליות עם טבלת MPN של הסתברויות סטטיסטיות כדי להעריך את מספר המיקרואורגניזמים. לאחר מכן ניתן ערך MPN עבור 100 מ"ל מהדגימה. MPN נמצא בשימוש נרחב לאיתור חיידקי קוליפורם הקיימים בדגימות מים.

איור 02: טבלת MPN

מה ההבדל בין CFU ל-MPN?

CFU לעומת MPN
CFU הוא מדד המשמש לבטא את מספר מושבות החיידקים או הפטריות הקיימות בדגימה נתונה.	MPN הוא מדד חלופי ל-CFU ומודד את מספר תאי החיידק הקיימא בדגימה נוזלית.
Unit
CFU/ml או CFU/g	MPN/100 ml
חישוב
CFU מחושב על ידי ספירת מספר המושבות שגדלו על לוחות אגר.	MPN מחושב על ידי השוואת דפוסים חיוביים ושליליים של הצינורות עם טבלה סטטיסטית MPN.
טכניקת דילול סדרתית
דילול סדרתי מתבצע לפני הנחת הדגימות על צלחות אגר.	דילול טורי אינו מבוצע בדרך כלל כאשר מחשבים MPN
שיטות
שיטת צלחת מריחה ושיטת צלחת לשפוך הן שני סוגים של שיטות שמבצעים להשגת CFU.	תסיסה מרובת צינורות היא השיטה שמבצעת כדי להשיג ערך MPN.

סיכום – CFU לעומת MPN

מדידה של גידול החיידקים נדרשת מסיבות רבות. במפעלים לעיבוד מזון, יש צורך למדוד את רמת וסוג המיקרואורגניזמים במזון. בתעשיית המזון והרפואה, יש צורך להבטיח כי טיפולי עיקור מיושמים ביעילות. במכוני טיהור שפכים, נדרש ספירת חיידקים באופן שגרתי. בעת אופטימיזציה של הליך בביולוגיה מולקולרית, נדרש למדוד את מספר המושבות על הלוחות. לפיכך, קיימות שיטות שונות לספירה ולמדידת צמיחה. CFU ו-MPN הן שתי שיטות כאלה המאומצות באופן נרחב בתחומים שונים. CFU הוא מדד למספר מושבות החיידקים והפטריות הקיימות בדגימה נתונה. זה מחושב באמצעות שיטת ספירת צלחות רגילה או שיטת ספירת צלחות קיימא. MPN הוא מדד נוסף המבטא את מספר תאי החיידק הקיימים בנפח נתון של דגימת הנוזל.זה מחושב באמצעות שיטת תסיסה מרובת צינורות וטבלת MPN. זה ההבדל בין CFU ל-MPN.