ההבדל העיקרי בין Giemsa Stain ל-Leishman Stain הוא שצביעת Giemsa שימושית בצביעה של אזורי DNA של כרומוזומים שונים כדי לחקור סטיות שונות כגון טרנסלוקציות וסידורים מחדש, בעוד שכתם Leishman שימושי במהלך צביעה וניתוח של מריחת דם להבדיל ולזהות טריפנוזומים, לויקוציטים וטפילי מלריה.
הצביעה היא צעד חיוני במהלך שיפור הניגודיות של תמונה מיקרוסקופית בהקשר של מיקרוסקופיה, במיוחד כדי להדגיש מבנים שונים בתאים וברקמות ביולוגיות. כתם גימסה וכתם לישמן שייכים לקבוצת כתמי רומנובסקי, הכוללים גם כתם רייט וכתם ג'נר.בדרך כלל, כתמי רומנובסקי שימושיים בצביעת מריחות דם. אנו משתמשים בזה בעיקר במהלך המחקר של מורפולוגיה של תאי דם אדומים וביצוע ספירת תאי דם לבנים דיפרנציאליים. צבעי Eosin Y ותכלת B הם המרכיבים הנפוצים לכתמי רומנובסקי. הליכי צביעה של רומנובסקי עוזרים באבחון של מצבי מחלה שונים כגון לוקמיה.
מהו Giemsa Stain?
כתם Giemsa בדרך כלל עוזר להבדיל בין מורפולוגיה ציטופלזמית וגרעינית של תאי דם כמו תאי דם לבנים, תאי דם אדומים וטסיות דם. כמו כן, זה עוזר להבדיל בין הטפילים. הוא משמש בעיקר לציטוגנטיקה ובאבחון של מלריה ומחלות טפיליות אחרות. יתר על כן, כתם Giemsa הוא ספציפי לקבוצות הפוספט הקיימות ב-DNA. הם נצמדים לאזורים שבהם יש מספר גבוה יותר של קשרי אדנין-תימין בגדיל ה-DNA.
איור 01: Giemsa Stain
יתר על כן, כתם Giemsa שימושי גם ב-Giemsa banding או G banding לצביעה של כרומוזומים וליצירת קריוגרמות. לכן, לכתם Giemsa יש את היכולת לזהות ולהמחיש חריגות שונות בכרומוזומים. לדוגמה, הטרופוזואיט של Trichomonas vaginalis, המוציא הפרשה ירקרקה ומורכב מתאי תנועה על תכשירים רטובים, מוכתם בכתם Giemsa. כפי שהוזכר לעיל, כתם Giemsa פועל ככתם סרט דם טיפוסי. כאשר צובעים, תאי דם אדומים צובעים בורוד, טסיות טסיות צובעות בורוד בהיר או בהיר, והציטופלזמה של לימפוציטים, מונוציטים וליקוציטים צובעים בכחול שמיים, כחול חיוור ומגנטה, בהתאמה.
כתם Giemsa הוא תערובת של אאוזין, מתילן כחול ותכלת B. תערובת תכלת מתילן שיוצרת אאוזין יחד עם כחול מתילן מייצבת תערובת זו.בתהליך של כתם Giemsa, סרט דק של הדגימה מונח על שקופית מיקרוסקופית תחילה. השלב הבא הוא קיבוע עם מתנול טהור למשך כ-30 שניות על ידי הוספת כמה טיפות של מתנול על השקף. לאחר מכן, השקופית טבולה בתמיסת הכתם Giemsa 5% למשך כ-20-30 דקות. השלב האחרון הוא שטיפת השקופית במי ברז והשאירה לייבוש.
מה זה לישמן סטיין?
הפתולוג הסקוטי ויליאם בוג לישמן הוא המפתח של כתמי לישמן. זהו אחד הכתמים השייכים לקבוצת כתמי רומנובסקי. יתר על כן, הוא מנוצל בדרך כלל יותר בהתמיינות וזיהוי של טפילי מלריה שונים, טריפנוזומים - פרוטוזואה חד-תאית, שהם טפילים ולוקוציטים.
איור 02: לישמן כתם
הבסיס של כתם לישמן הוא תערובת מתנולית המכילה תערובת של מתילן כחול שהוא 'פוליכרום'; דה מתיל לסוגים שונים של תכלת ואאוזין. בשל היציבות של תמיסת המניות של התערובת המתנולית, אנו יכולים להשתמש בה ישירות לקיבוע המריחה, תוך ביטול שלב הקדמה. היציבות יורדת אם התמיסה מעורבבת עם חיץ מימי. בעת ביצוע ספירת תאים דיפרנציאלית, כתם לישמן מספק צבע סגול בהיר אופייני לגרעין ולגרגירי נויטרופילים. לפיכך, זה משפר את ההבחנה בין הגרעין לציטופלזמה. כמו כן, כתם לישמן מספק צביעה ניגודית איכותית יותר בהשוואה לכתמים אחרים המבוססים על מתילן כחול ואאוזין.
מאחר ומרכיבים ציטופלזמיים שונים זוכים להתייחסות חדה לצורך בידול וזיהוי, המטולוגים מעדיפים את כתם לישמן בהשוואה לכתמי רומנובסקי אחרים.בזיהוי טפילי מלריה, הליכי צביעה של לישמן רגישים ומדויקים יותר מכתמים אחרים כמו כתמי פילד.
מהם הדמיון בין Giemsa Stain ל-Leishman Stain?
- כתם גימסה וכתם לישמן הם כתמים דיפרנציאליים.
- שניהם שימושיים במהלך ביצוע ספירת תאי דם לבנים דיפרנציאליים ומחקר של מורפולוגיה של תאי דם אדומים.
- יתר על כן, שני הכתמים שייכים לקבוצת כתמי רומנובסקי.
מה ההבדל בין Giemsa Stain לכתם Leishman?
צביעת Giemsa שימושית בצביעה של אזורי DNA של כרומוזומים שונים כדי לחקור סטיות שונות כגון טרנסלוקציות וסידורים מחדש, בעוד שצבע Leishman שימושי בצביעת דם כדי להבדיל ולזהות טריפנוזומים, לויקוציטים וטפילי מלריה. אז זה ההבדל העיקרי בין כתם Giemsa לכתם לישמן.
יתר על כן, הבקטריולוג גוסטב גימסה פיתח את טכניקת הצביעה של Giemsa, בעוד הפתולוג ויליאם בוג לישמן פיתח את טכניקת הצביעה של Leishman. יתר על כן, הבדל משמעותי נוסף בין כתם Giemsa לכתם לישמן הוא הרכב הכתם. כתם Giemsa הוא תערובת של אאוזין, מתילן כחול ותכלת B ואילו כתם לישמן הוא תערובת מתנולית המכילה תערובת של מתילן כחול.
סיכום – Giemsa Stain נגד Leishman Stain
בהקשר של מיקרוסקופיה, טכניקות צביעה ממלאות תפקיד מרכזי בהגברת הניגודיות של תמונות מיקרוסקופיות של רקמות ביולוגיות שונות. צביעת Giemsa שימושית בצביעה של אזורי DNA של כרומוזומים שונים כדי לחקור סטיות שונות כגון טרנסלוקציות וסידורים מחדש.כתם לישמן שימושי בצביעה וניתוח של מריחת דם כדי להבדיל ולזהות טריפנוזומים, לויקוציטים וטפילי מלריה. אז זה ההבדל בין כתם Giemsa לכתם לישמן.
