ההבדל העיקרי בין אימונו-משקל וקו-אימוניות הוא ש-immunoprecipitation היא טכניקה המזרזת חלבון מתוך התמיסה באמצעות נוגדן ספציפי, בעוד Coimmunoprecipitation היא טכניקה המזרזת קומפלקסים חלבונים שלמים מתוך התמיסה באמצעות נוגדן ספציפי.
אינטראקציה אנטיגן-נוגדנים היא אינטראקציה כימית ספציפית בין נוגדנים המיוצרים על ידי תאי B ואנטיגנים (חלבונים) במהלך תגובה חיסונית. בדרך כלל, אנטיגנים מסיסים מתחברים עם נוגדנים מסיסים בנוכחות אלקטרוליט בטמפרטורה ו-pH מסיסים על מנת ליצור קומפלקס בלתי מסיס גלוי.זה נקרא תגובת משקעים. לכן, משקעים חיסוניים וקו-אימוניות הם שני סוגים של תגובות משקעים המשמשות באופן שגרתי במעבדות לזיהוי חלבונים כגון אנטיגנים.
מהו אימונו-משקל?
Immunoprecipitation היא טכניקה של שיקוע חלבון מתוך תמיסה באמצעות נוגדן ספציפי. לפעמים, טכניקה זו ידועה גם בשם משקעים חיסוניים של חלבון אינדיבידואלי. Immunoprecipitation משתמש בנוגדן כדי לבודד חלבון נבחר של עניין מ-lysate התא. הנוגדן מטהר את חלבון היעד הספציפי שלו או אנטיגן מתערובת. הנוגדן נקשר לחלבון, וקומפלקס הנוגדן-אנטיגן נשלף מהדגימה. במערך הניסוי, קומפלקס האנטיגן-נוגדנים נשלף באמצעות חלבון A/G צמוד אגרוז או חרוזים מגנטיים. מאוחר יותר, החרוזים נשטפים, והחלבון המעניין הוא eluted. החלבון או האנטיגן המטוהרים המתקבלים על ידי משקעים אימונו מאומתים על ידי מגוון טכניקות כגון בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (ELISA) ו-Western blot (WB).
איור 01: משקעים אימוניים
יתר על כן, ניתן לכמת ולזהות חלבונים או אנטיגנים מבודדים באמצעות ספקטרומטריית מסה על ידי שימוש בדפוסי עיכול אנזימטיים המבוססים על הרצף הראשוני. ישנם שיקולים מסוימים לפני שמתחילים ניסוי אימונו-משקל: בחירת פורמט שיטה, קשירת חלבונים וחרוזים, בחירת הנוגדן והאיזוטיפ הראשוני הנכונים ובקרה שלילית.
מהו Coimmunoprecipitation?
Coimmunoprecipitation היא טכניקה של לזרז קומפלקסים של חלבונים שלמים מתוך התמיסה באמצעות נוגדן ספציפי. Coimmunoprecipitation פועל בדרך כלל על ידי בחירת נוגדן ספציפי המכוון לחלבון ידוע (אנטיגן) אשר מאמינים שהוא חבר במכלול גדול יותר של חלבונים.על ידי מיקוד לאיבר הידוע עם נוגדן ספציפי, ניתן למשוך את כל קומפלקס החלבון מהתמיסה. זה מאפשר זיהוי של חברי המתחם האלמונים. הרעיון של משיכת קומפלקסים של חלבון מהתמיסה מכונה לפעמים מנגנון "משיכה למטה".
איור 02: B Coimmunoprecipitation
Coimmunoprecipitation היא טכניקה רבת עוצמה המשמשת לניתוח אינטראקציות חלבון-חלבון. המטרה העיקרית של coimmunoprecipitation היא זיהוי של שותפים באינטראקציה כגון ליגנדים, cofactors או מולקולות איתות לחלבון המעניין. יתר על כן, coimmunoprecipitation היא טכניקה יעילה המשמשת להפרדת חלבונים מסרום, תאי תא, רקמה הומוגנית או מדיה מותנית.
מהם הדמיון בין משקעים חיסוניים ל-Coimmunoprecipitation?
- אימונו-משקעים וקו-אימוניות הם שני סוגים של טכניקות מבוססות תגובת משקעים.
- ניתן להשתמש בשתי הטכניקות לזיהוי אנטיגן מטרה באמצעות נוגדן ספציפי.
- שתי הטכניקות תלויות מאוד באינטראקציה של אנטיגן-נוגדנים.
- הם נמצאים בשימוש שוטף במעבדות קליניות.
מה ההבדל בין משקעים חיסוניים ל-Coimmunoprecipitation?
Immunoprecipitation היא טכניקה המזרזת חלבון מתוך התמיסה באמצעות נוגדן ספציפי, בעוד Coimmunoprecipitation היא טכניקה המזרזת קומפלקסים של חלבונים שלמים מתוך התמיסה באמצעות נוגדן ספציפי. לפיכך, זהו ההבדל העיקרי בין משקעים חיסוניים ל-coimmunoprecipitation. יתר על כן, נפוץ יותר משקעים חיסוניים במעבדות, בעוד שלא נעשה שימוש בדרך כלל ב-coimmunoprecipitation במעבדות.
האינפוגרפיקה שלהלן מציגה את ההבדלים בין משקעים חיסוניים וקו-אימוניים בצורת טבלה להשוואה זה לצד זה.
סיכום – משקעים חיסוניים לעומת משקעים אימוניים
Immunoprecipitation ו-coimmunoprecipitation הם שני סוגים של טכניקות מבוססות תגובת משקעים התלויות באינטראקציה של אנטיגן-נוגדנים. טכניקת ה-immunoprecipitation מזרזת חלבון מתוך התמיסה באמצעות נוגדן ספציפי, בעוד שטכניקת ה-coimmunoprecipitation מזרזת קומפלקסים של חלבונים שלמים מתוך התמיסה באמצעות נוגדן ספציפי. אז זה מסכם את ההבדל בין משקעים חיסוניים לקואימוניות.
