הבדל מפתח – תרבות חד-שכבה לעומת השעיה
תרבית רקמות היא מתודולוגיה המשמשת להשראת צמיחה של תאים המופרדים מהאורגניזם ומגודלים במדיות תרבית שונות. בתרבית רקמות, אמצעי התרבות ממלאים תפקיד חשוב. תאים שונים גדלים במדיות תרבות שונות בהתאם לתכונות הפיזיולוגיות והכימיות של התאים. תרבית חד-שכבתית ותרבות השעיה הם שני סוגים עיקריים של תרבויות המשמשות בתהליך של תרבית רקמות. תרבית חד-שכבתית היא תרבית תלוית עיגון שבה התא גדל בעודו מחובר למצע ותרבות ההשעיה היא תרבית בלתי תלויה בעיגון שבה נעשה שימוש באגרגטים של תאים לביסוס תרביות תאים במדיה נוזלית.זהו ההבדל העיקרי בין תרבות החד-שכבה לתרבות ההשעיה.
מהי תרבות חד-שכבתית?
תרבית חד-שכבתית מוגדרת כסוג של תרבית שבה מעבדים תאים בשכבה אחת על גבי צלוחית או צלחת פטרי המכילה את מצע התרבות. תרבות חד-שכבתית מכונה גם תרבות דבקה או תרבות תלוית עיגון. הסיבה להתייחסות לתרבית דבקה או תלוית עיגון היא שתאים אלו זקוקים למצע להתקשרות במהלך הצמיחה שלהם. הם נדבקים לתרבית התאים המכילה את המצע.
יש לטעון את המצעים המשמשים במצע התרבות לפני השימוש. מצעים טעונים אלה מקדמים אינטראקציות בין תא לתא. מפרק יונים חשמלי, ציפוי קטיון דו ערכי והקרנות גמא הם המקורות המשמשים לטעינת מצעים אלו. במדיום תרבית חד-שכבתי, ברגע שהתאים מחוסנים, הצמיחה מווסתת בעזרת התהליך הנקרא עיכוב מגע.במהלך עיכוב מגע, צמיחת התאים נעצרת כדי לעצור את התפשטותם של תאים נורמליים ברגע שהם יצרו חד-שכבה המחוברת לפני השטח.
איור 01: תרבות דבקה
התאים התלויים במצעים אחרים לצורך התקשרות מכונים תאים נצמדים. תאים נצמדים אלו נגזרים לרוב מרקמות איברים כגון כליות וכו'. תאים אלו אינם תנועתיים והם מחוברים בדרך כלל לרקמת החיבור. לכן, יש לספק את כל גורמי הגדילה החיוניים הללו בעת גידול תאים אלה על מדיית תרבות. החשיבות של תרבות חד-שכבתית היא שהיא מחקה את התנאים הטבעיים המקוריים לתא להתבסס כראוי.
מהי תרבות ההשעיה?
ניתן להגדיר תרבית תרחיף כסוג של תרבית שבה מתרחש ריבוי של מקבץ קטן של תאים או תאים בודדים תלויים במדיום נוזלי שמעורער כל הזמן.במונחים אחרים, תרבית השעיה ידועה גם כתרבית תאים של תרבית תרחיף תאים. תרבית זו מסייעת בהקמת תרביות תאים בודדות שניתן להשתמש בהן במהלך החקירה של תאי צמחים בהתייחס לפוטנציאלים ולמאפיינים השונים שלהם. ניתן להשתמש בחקירה לגבי היבט זה כדי להבין את יחסי הגומלין בין תאים והשפעותיהם בכל הנוגע לאורגניזמים רב-תאיים.
במהלך התפתחות הצמח הראשונית, נוצר קאלוס שהוא מסה של תאים לא מובחנים. רמת צמיחה זו גורמת למכשולים לזיהוי אירועים תאיים בשלבי הגדילה וההתפתחות של הצמח. תרבית מרחפת הוכנסה כדי להתגבר על מצב זה מכיוון שהיא סיפקה מצע תרבות מצוין להקמת תרביות תאים בודדים מאגרגטים של תאים קטנים המתקבלים מהקלוס. זה נוצל כדי לחקור היבטים מורפולוגיים וביוכימיים שונים בשלבים הראשונים של התפתחות הצמח.
איור 02: תרבות ההשעיה
בהקשר של השגת תרבית תאים אידיאלית, השיטה האופיינית היא להעביר מסה פריכה של קאלוס לתוך תווך נוזלי נסער שבו המסה נשברת ומתפזרת בקלות. לאחר מכן, הקאלי הגדול מסונן החוצה תוך שמירה על צבירי תאים קטנים ותאים בודדים. ואז תאים אלה מועברים למדיום אחר. תאים שגדלים באופן פעיל מתקבלים לאחר שבועיים עד שלושה.
מהם הדמיון בין תרבות חד-שכבה לתרבות השעיה?
- הן תרביות חד-שכבתיות והן תרביות מתלה הן שני סוגים של תרביות תאים המשמשות להקמת תאים
- הן סוגי תרבויות חד-שכבתיות והן מתלהמות גדלים על מדיית תרבות מתאימה.
- הן תרביות חד-שכבתיות והן תרביות תרחיף משמשות בדרך כלל בתרבית רקמות.
מה ההבדל בין תרבות חד-שכבה לתרבות השעיה?
חד-שכבה לעומת תרבות השעיה |
|
| תרבית חד-שכבתית היא תרבית תלוית עיגון שבה התאים גדלים כשהם מחוברים למצע. | תרבית השעיה היא תרבית עצמאית לעגון שבה מתרחש ריבוי של אגרגטים קטנים של תאים או תאים בודדים תלויים בתווך נוזלי שמעורער. |
| דרישות | |
| תרבית חד-שכבתית דורשת כלי מטופל בתרבית רקמה עם מעבר תקופתי. | ניתן להשיג תרבית השעיה על ידי כלים שאינם מטופלים בתרבית רקמה. |
| הגבלות צמיחה | |
| צמיחת התרבות החד-שכבתית תוגבל על ידי שטח הפנים המשפיע ישירות על התשואה. | הגבלת הגדילה של תרבית ההשעיה מתבצעת על ידי ריכוז התאים במדיום. |
| ניתוק תאים | |
| ניתוק תאים מתרחש באופן מכני או אנזימטי בתרבות חד-שכבתית. | תרבות ההשעיה אינה דורשת סיוע של אנזימים ואמצעים מכניים לפירוק תאים. |
| Cell Visualization | |
| תרבות חד-שכבתית מאפשרת הדמיה קלה של תאים. | קשה יותר לראות תאים בתרביות השעיה. |
| פונקציה | |
| תרבות חד-שכבתית משמשת בתחומי ציטולוגיה, מחקר וקצירת מוצרים מתמשכת. | תרבית תרחיף משמשת לייצור בכמות גדולה של חלבונים, מחקרים וקצירת אצווה. |
סיכום – חד-שכבה לעומת תרבות השעיה
תרבית חד-שכבתית ותרבות תרחיף הן שתי תרבויות עיקריות המשמשות בתרבית רקמות. התרבות החד-שכבתית היא תרבות תלוית עיגון. התאים גדלים בתרבית זו שם הם מחוברים למצע הקיים בתרבית. המצעים נטענים לפני השימוש תוך מעורבות של מקורות שונים כגון ציפויים דו ערכיים ומפרק יונים. תרביות תלויות הן תרביות בלתי תלויות בעיגון בהן התאים גדלים ללא עזרת מצע להתקשרות. תרבית זו מסייעת בהקמת תרביות תאים בודדות שניתן להשתמש בהן במהלך החקירה של תאי צמחים בהתייחס לפוטנציאלים ולמאפיינים השונים שלהם.זה ההבדל בין תרבות חד-שכבתית לתרבות השעיה.
