הבדל מפתח - ציטומטריית זרימה לעומת FACS
בהקשר של תורת התא, תאים הם היחידה המבנית והתפקודית הבסיסית של כל האורגניזמים החיים. מיון תאים הוא מתודולוגיה המשמשת להפרדת תאים שונים בהתאם למאפיינים הפיזיולוגיים והמורפולוגיים. הם יכולים להיות בעלי מאפיינים תוך תאיים או תאיים. אינטראקציה של DNA, RNA וחלבונים נחשבים כמאפיינים אינטראקטיביים תוך-תאיים בעוד שהצורה, הגודל וחלבוני פני השטח השונים נחשבים כמאפיינים חוץ-תאיים. במדע המודרני, מתודולוגיות מיון תאים הובילו לסייע לחקירה השונה במחקרים ביולוגיים וגם בביסוס עקרונות חדשים באמצעות מחקר ברפואה.מיון התאים מתבצע במתודולוגיות שונות הכוללות הן פרימיטיביות עם פחות ציוד והן מתודולוגיות טכנולוגיות מתקדמות עם שימוש במכונות מתוחכמות. ציטומטריית זרימה, מיון תאים פעיל פלואורסצנטי (FACS), בחירת תאים מגנטיים ומיון תאים בודדים הם המתודולוגיות העיקריות בשימוש. ציטומטריית זרימה ו-FACS פותחו כדי להבדיל בין תאים לפי התכונות האופטיות שלהם. FACS הוא סוג מיוחד של ציטומטריית זרימה. ציטומטריית זרימה היא מתודולוגיה אשר מנוצלת במהלך ניתוח של אוכלוסייה הטרוגנית של תאים על פי מולקולות שונות של פני התאים, גודל ונפח שונים המאפשרת חקירה של תאים בודדים. FACS הוא תהליך שבאמצעותו תערובת דגימה של תאים ממוינת לפי מאפייני פיזור האור והקרינה לשני מיכלים או יותר. זהו ההבדל העיקרי בין ציטומטריית זרימה ל-FACS.
מהי ציטומטריית זרימה?
ציטומטריית זרימה היא שיטה המשמשת לבחינה ולקביעת הביטוי של מולקולות תוך-תאיות ומשטח התא וכדי להגדיר ולאפיין סוגי תאים שונים.הוא משמש גם בקביעת נפח התא וגודל התא וכדי להעריך את הטוהר של תת-אוכלוסיות המבודדות. זה מאפשר הערכה מרובה פרמטרים של תאים בודדים בערך באותו זמן. ציטומטריית זרימה משמשת למדידת עוצמת הקרינה המופקת עקב נוגדנים המסומנים בפלורסצנטי המסייעים לזהות חלבונים או ליגנדים הנקשרים לתאים הקשורים.
איור 01: ציטומטריית זרימה
באופן כללי, ציטומטריית זרימה כוללת שלוש תת-מערכות בעיקר. הם הנוזלים, האלקטרוניקה והאופטיקה. ב-flow cytometry, זמינים חמישה מרכיבים עיקריים המשמשים במיון תאים. הם, תא זרימה (זרם נוזל המשמש להובלתם ויישור התאים לתהליך חישה אופטי), מערכת מדידה (יכולה להיות ממערכות שונות כולל מנורות כספית וקסנון, מקוררות מים בעוצמה גבוהה או לייזרים מקוררי אוויר או לייזרים דיודות בהספק נמוך), ADC; מערכת ממיר אנלוגי לדיגיטל, מערכת הגברה ומחשב לניתוח.הרכישה היא התהליך שבו נאספים הנתונים מהדגימות באמצעות ציטומטר זרימה. תהליך זה מתווך על ידי מחשב המחובר לציטומטר הזרימה. התוכנה הקיימת במחשב מנתחת את המידע המוזן למחשב מציטומטר הזרימה. לתוכנה יש גם את היכולת להתאים פרמטרים של הניסוי השולט על ציטומטר הזרימה.
מה זה FACS?
בהקשר של Flow cytometry, מיון תאים מופעל על ידי פלואורסצנציה (FACS) היא שיטה המשמשת בהבחנה ומיון של דגימה של תערובת של תאים ביולוגיים. התאים מופרדים משני מיכל או יותר. שיטת המיון מבוססת על התכונות הפיזיקליות של התא הכוללות פיזור אור ומאפייני הקרינה של התא. זוהי טכניקה מדעית חשובה, שניתן להשתמש בה כדי להשיג תוצאות כמותיות ואיכותיות אמינות של אותות הקרינה הנפלטים מכל תא.במהלך FACS, בתחילה, תערובת התאים שהושגה מראש; תרחיף מופנה למרכז זרם צר של נוזל שזורם במהירות. זרימת הנוזל נועדה להפריד בין התאים בתרחיף לפי קוטר כל תא. מנגנון רטט מופעל על זרם ההשעיה שגורם להיווצרות טיפות בודדות.
איור 02: FACS
המערכת מכוילת על מנת ליצור טיפה אחת עם תא אחד. רגע לפני היווצרות טיפות, מתרחץ הזרימה נע לאורך מנגנון מדידת הקרינה המזהה את הקרינה האופיינית לכל תא. בנקודת היווצרות של טיפות מונחת טבעת טעינה חשמלית אשר מושרה מטען לטבעת לפני מדידת עוצמת הקרינה.ברגע שהטיפות נוצרות מזרם ההשעיה, מטען נכלא בתוך הטיפות שנכנס למערכת סטיה אלקטרוסטטית. לפי האישום, המערכת מפנה את הטיפות למיכלים שונים. שיטת היישום של החיוב משתנה בהתאם למערכות השונות המשמשות ב-FACS. הציוד המשמש ב-FACS ידוע בתור סדרן תאים מופעל פלואורסצנטי.
מהו הדמיון בין ציטומטריית זרימה ל-FACS?
ציטומטריית זרימה ו-FACS פותחו כדי להבדיל בין תאים לפי התכונות האופטיות שלהם
מה ההבדל בין ציטומטריית זרימה ל-FACS?
ציטומטריית זרימה לעומת FACS |
|
| ציטומטריית זרימה היא מתודולוגיה המשמשת במהלך ניתוח של אוכלוסייה הטרוגנית של תאים לפי מולקולות שונות של פני התאים, גודל ונפח שונים, המאפשרת חקירה של תאים בודדים. | FACS הוא תהליך שבו ממוינת תערובת דגימה של תאים לפי מאפייני פיזור האור והקרינה לשני מיכלים או יותר. |
סיכום – ציטומטריית זרימה לעומת FACS
התא הוא היחידה המבנית והתפקודית הבסיסית של כל האורגניזמים החיים. מיון תאים הוא התהליך שבו תאים מבודדים ומתמיינים לקטגוריות שונות על סמך התכונות התוך-תאיות והחוץ-תאיות שלהם. ציטומטריית זרימה ו-FACS הן שתי מתודולוגיות חשובות במיון תאים. שני התהליכים פותחו כדי להבדיל בין תאים לפי תכונותיהם האופטיות. ציטומטריית זרימה היא מתודולוגיה אשר מנוצלת במהלך ניתוח של אוכלוסייה הטרוגנית של תאים על פי מולקולות שונות של פני התאים, גודל ונפח שונים המאפשרת חקירה של תאים בודדים. FACS הוא תהליך שבאמצעותו תערובת דגימה של תאים ממוינת לפי מאפייני פיזור האור והקרינה לשני מיכלים או יותר.זה ההבדל בין ציטומטריית זרימה ל-FACS.
הורד את גרסת ה-PDF של Flow Cytometry לעומת FACS
ניתן להוריד את גרסת ה-PDF של מאמר זה ולהשתמש בה למטרות לא מקוונות לפי הערת ציטוט. אנא הורד כאן גרסת PDF ההבדל בין ציטומטריית זרימה ו-FACS
