ההבדל העיקרי בין סינון ג'ל לכרומטוגרפיית זיקה הוא שכרומטוגרפיית סינון ג'ל תלויה בהבדלים במשקל המולקולרי או בגודל של דגימת האנליט, בעוד שכרומטוגרפיית זיקה תלויה בזיקה של אנליט לליגנד משותק.
המונח כרומטוגרפיה בכימיה אנליטית מתייחס לתהליך ההפרדה של רכיבים בתערובת באמצעות טכניקות שונות. כרומטוגרפיה הוא שם כולל המייצג מספר שונות של שיטות שונות להפרדה.
מהו כרומטוגרפיית סינון ג'ל?
כרומטוגרפיה של סינון ג'ל היא טכניקה אנליטית שבה הפרדת הרכיבים תלויה בהבדל במשקל או בגודל המולקולרי. טכניקה זו ידועה גם ככרומטוגרפיה של אי הכללת גודל או כרומטוגרפיה של מסננת מולקולרית. טכניקת ההפרדה בתהליך זה תלויה ביכולת השונה של מולקולות בדגימה להיכנס לתוך הנקבוביות של מדיום סינון הג'ל.
בטכניקת סינון ג'ל, השלב הנייח מכיל חרוזים של חומר לחות דמוי ספוג בעל נקבוביות במידות מולקולריות המכילות טווח מצומצם של גדלים. אם נעביר תמיסה מימית המורכבת ממולקולות בגדלים שונים דרך עמודה המכילה את "המסננות המולקולריות" הללו, המולקולות שגדולות מהנקבוביות של מדיום הסינון עוברות במהירות בעמודה. לעומת זאת, המולקולות הקטנות יותר נכנסות לנקבוביות הג'ל ונוטות לנוע לאט דרך העמוד. מולקולות יוצאות מהעמוד בסדר הגודל המולקולרי יורד.כאן, גבול ההרחקה של הג'ל הוא המסה המולקולרית של המולקולות הקטנות ביותר שאינן מסוגלות לחדור לנקבוביות של ג'ל נתון.
ישנם סוגים שונים של טכניקות סינון ג'ל, כגון שיטת סינון ג'ל עקיפה, סינון ג'ל במצב יציב, דיאליזה של חרוזי ג'ל וכו'. כרומטוגרפיה עקיפה של סינון ג'ל שימושית בקביעת הורמוני בלוטת התריס החופשיים. כרומטוגרפיה של סינון ג'ל במצב יציב היא טכניקה עקיפה המועילה בעיקר למדידת סטרואידים חופשיים כמו קורטיזול, טסטוסטרון וכו'. דיאליזה של חרוזי ג'ל, לעומת זאת, היא שינוי של סינון ג'ל במצב יציב שהוא פשוט יותר יחסית.
מהי כרומטוגרפיית זיקה?
כרומטוגרפיה זיקה היא טכניקה אנליטית ושיטת הפרדה התלויה באינטראקציה מחייבת ספציפית בין ליגנד משוקע ובין שותפו לקשר.כמה דוגמאות כוללות קישור נוגדן-אנטיגן, קישור אנזים-סובסטרט וקשירת אנזים-מעכב. לכן, לטכניקה זו יש יישומים חשובים רבים בטיהור חומצות גרעין, טיהור חלבונים מתמציות תאים וטיהור מדם.
בטכניקה זו, התכונה החשובה ביותר היא אי מוביליזציה של ליגנד. אנו יכולים להשתמש בחומרים שונים כגון אקרילטים וסיליקה ג'ל לשם כך. חשוב למנוע הפרעה סטרית של מולקולת המטרה לליגנד. יתר על כן, מעכב מחובר לשלב המוצק. אנו קוראים לעכב הזה מרווח. באופן קלאסי, מרווח מורכב משרשרת פחמימנים.
השלב הנייח של כרומטוגרפיית הזיקה מכיל את הליבה, המרווח והליגנד.לפעמים, יש לו גם יון מתכת שמחובר לליגנד. הפאזה המוצקה המועדפת ביותר עבור השלב הנייח בטכניקה זו היא ג'ל אגרוז מכיוון שהוא מופק בקלות כדי למלא ולארוז את העמוד עם מיטות שרף בכל גודל, והוא גדול מספיק עבור ביומולקולות לזרום בחופשיות לתוך החרוזים ובאמצעותם. הליגנדים יכולים להיצמד באופן קוולנטי לפולימר החרוזים בדרכים שונות. תרכובות הרווח הנפוצות ביותר הן ציאנוגן ברומיד, אפוקסיד, אפוקסיד עם חומצה C6 ודימין. מצד שני, הליגנד שאנו יכולים להשתמש בו שונה בהתאם למטרה, למשל נוגדן-אנטיגן, יוני ברזל או אלומיניום-פוספופרוטאינים, אבידין-ביוטין, גלוטתיון-GST, חלבונים מתויגים chelator-His וכו'.
מה ההבדל בין סינון ג'ל לכרומטוגרפיית זיקה?
כרומטוגרפיה היא טכניקה אנליטית חשובה. כרומטוגרפיה של סינון ג'ל וכרומטוגרפיה זיקה הן שתי וריאציות חשובות של כרומטוגרפיה. ההבדל העיקרי בין סינון ג'ל לכרומטוגרפיה של זיקה הוא שכרומטוגרפיית סינון ג'ל תלויה בהבדלים במשקל המולקולרי או בגודל של דגימת האנליט, בעוד שכרומטוגרפיה של זיקה תלויה בזיקה של אנליט לליגנד מקובע.
סיכום – סינון ג'ל לעומת כרומטוגרפיה זיקה
קיימים סוגים שונים של טכניקות כרומטוגרפיות בהתאם ליישום שלהם ולאופי דגימת האנליט. סינון ג'ל וכרומטוגרפיה זיקה הם שני סוגים כאלה של טכניקות. ההבדל העיקרי בין סינון ג'ל לכרומטוגרפיה זיקה הוא שכרומטוגרפיית סינון ג'ל תלויה בהבדלים במשקל המולקולרי או בגודל של דגימת האנליט, בעוד שכרומטוגרפיית זיקה תלויה בזיקה של אנליט לליגנד משותק.
