ההבדל העיקרי בין pBR322 ל-pUC19 הוא ש-pBR322 הוא וקטור פלסמיד שאורכו 4361 זוגות בסיסים, בעוד ש-pUC19 הוא וקטור פלסמיד שאורכו 2686 זוגות בסיסים.
וקטור שיבוט הוא חתיכה קטנה של DNA שניתן לשמור באורגניזם בצורה יציבה. זהו גם חתיכת DNA קטנה שלתוכה ניתן להחדיר שבר DNA זר למטרות שיבוט. וקטור מכיל תכונות חשובות המאפשרות החדרה נוחה של קטע DNA זר לוקטורים, כגון אתרי הגבלה, סמן לבחירה, גן מדווח ואלמנט של ביטוי. השיבוט בוצע לראשונה באמצעות E.קולי. וקטורי שיבוט עבור E. coli כוללים פלסמידים, בקטריופאג'ים, קוסמידים וכרומוזומים מלאכותיים של חיידקים (BAC). הווקטורים הנפוצים ביותר הם פלסמידים מהונדסים גנטית. pBR322 ו-pUC19 הם שני סוגים של וקטורי פלסמיד.
מה זה pBR322?
pBR322 הוא וקטור פלסמיד. זהו אחד מהוקטורי השיבוט הראשונים בשימוש נרחב עבור E. coli. וקטור זה נוצר לראשונה בשנת 1977 במעבדתו של הרברט בוייר באוניברסיטת קליפורניה, סן פרנסיסקו. זהו DNA דו-גדילי עגול שאורכו 4361 זוגות בסיסים.
איור 01: pBR322
לווקטור הפלסמיד הזה יש תכונות מיוחדות. בדרך כלל, יש לו שני גנים עמידות לאנטיביוטיקה: גן bla המקודד לחלבון העמידות לאמפיצילין (AmpR) וגן tetA המקודד לעמידות לטטרציקלין (TetR) חלבון.יתר על כן, הוא מכיל את מקור השכפול של pMB1. לוקטור פלסמיד זה יש גם גן rop המקודד למגביל של מספר עותק פלסמיד. יתר על כן, לוקטור זה יש אתרי הגבלה ייחודיים ליותר מ-40 אנזימי הגבלה. אחד עשר מתוך אותם ארבעים אתרי הגבלה נמצאים בגן TetR . ישנם שני אתרי הגבלה לאנזימי הגבלה HindIII ו-ClaI בתוך המקדם של הגן TetR . יתר על כן, ישנם שישה אתרי הגבלה חשובים מאוד בתוך הגן AmpR. pBR322 הוא וקטור שיבוט עם מספר העתקות נמוך. זה מספק בערך 20 עותקי פלסמיד לכל תא חיידקי. המשקל המולקולרי של הווקטור הוא 2.83×106 d altons.
מה זה pUC19?
pUC19 הוא וקטור פלסמיד שאורכו 2686 זוגות בסיסים. זהו אחד מסדרת וקטורי הפלסמיד שנוצרו על ידי יואכים מסינג ועמיתיו לעבודה. העבודה המוקדמת על סדרת פלסמידים זו נערכה באוניברסיטת קליפורניה. זהו DNA דו-גדילי עגול.
איור 02: pUC19
וקטור הפלסמיד הזה מכיל גם תכונות חשובות. יש לו מקטע N קצה של גן β גלקטוזידאז (lacz). יש לו גם אזור של אתרי שיבוט מרובים (MCS). אזור זה מפוצל לקודון 6 ו-7 של גן lacz. אזור MCS מספק אתרי הגבלה של אנדונוקלאזים רבים. בנוסף לגן β glactosidase, pUC19 מקודד גם לגן עמידות לאמפיצילין (AmpR). יתר על כן, מקור השכפול נגזר מפלסמיד pMB1. למרות ש-pUC19 קטן בגודלו, יש לו מספר עותקים גבוה (500-700 עותקים לתא חיידקי). המשקל המולקולרי של וקטור פלסמיד זה הוא 1.75×106 d altons.
מה הם קווי הדמיון בין pBR322 ל-pUC19?
- pBR322 ו-pUC19 הם שני סוגים של וקטורי פלסמיד.
- הם וקטורי שיבוט פופולריים לקולי.
- לשני וקטורי הפלסמיד יש את אותו מקור שכפול של פלסמיד pMB1.
- לווקטורים האלה יש אתרי הגבלה מרובים.
- לשני וקטורי הפלסמיד יש גן עמידות לאמפיצילין כסמן לבחירה.
מה ההבדל בין pBR322 ל-pUC19?
pBR322 הוא וקטור פלסמיד שאורכו 4361 זוגות בסיסים, בעוד pUC19 הוא וקטור פלסמיד שאורכו 2686 זוגות בסיסים. לפיכך, זהו ההבדל העיקרי בין pBR322 ל-pUC19. יתר על כן, pBR322 הוא וקטור פלסמיד עם מספר העתקות נמוך, בעוד pUC19 הוא וקטור פלסמיד עם מספר העתקות גבוה.
האינפוגרפיקה שלהלן מציגה את ההבדלים בין pBR322 ל-pUC19 בצורה טבלה להשוואה זו לצד זו.
סיכום – pBR322 לעומת pUC19
ווקטורי השיבוט הנפוצים ביותר עבור E.coli הם פלסמידים מהונדסים גנטית.pBR322 ו-pUC19 הם שני סוגים של וקטורים פלסמידים. pBR322 הוא וקטור פלסמיד שאורכו 4361 זוגות בסיסים, בעוד pUC19 הוא וקטור פלסמיד שאורכו 2686 זוגות בסיסים. אז זה ההבדל העיקרי בין pBR322 ל-pUC19.
